Tetrazolium biru klorida, formula kimia C40H32Cl2N8O2, CAS 1871-22-3, biasanya kelihatan sebagai pepejal hablur kuning limau atau tidak berwarna. Larut dalam air panas dan aseton, tetapi kurang larut dalam kloroform. Ia mempunyai tahap higroskopisitas tertentu dan sensitif kepada cahaya. Ia boleh dikurangkan kepada nitrogen tetrazolium biru di bawah tindakan agen pengurangan. Tetrazolium biru boleh digunakan untuk menentukan aktiviti suksinat dehidrogenase (SDH) dalam strain yis, yang telah dikurangkan kepada substrat. Ekstrak nitrogen tetrazolium biru daripada sel menggunakan dimetil sulfoksida dan uji spektrum penyerapan nitrogen tetrazolium biru. Tetrazolium biru memaparkan julat panjang gelombang yang luas 480-600nm, dengan penyerapan yang boleh dilihat pada 540nm. Tetrazolium biru mengikat kepada suksinat dehidrogenase (SDH). Ia adalah pewarna biru yang digunakan untuk penyelidikan mikrob, yang boleh mengotorkan bakteria dan kulat dan mempunyai aplikasi yang baik dalam penyelidikan biokimia asas. Di samping itu, bahan ini juga boleh digunakan untuk penentuan oksidoreduktase (seperti suksinat dehidrogenase).
|
|
|
|
Formula kimia |
C40H32N8Cl2O22+ |
|
Misa tepat |
726 |
|
Berat Molekul |
728 |
|
m/z |
726 (100.0%), 728 (63.9%), 727 (43.3%), 729 |
|
Analisis Unsur |
C, 66.03; H, 4.43; Cl, 9.74, N, 15.40; O, 4.40 |
Tetrazolium biru klorida, sebagai sebatian pelbagai fungsi, telah menunjukkan aplikasi yang luas dalam penyelidikan saintifik dan aplikasi praktikal.
(1) Mengurangkan pengesanan gula
Tetrazolium chloride blue sering digunakan dalam penyelidikan biokimia untuk mengesan gula penurun. Dalam larutan alkali yang dipanaskan, tetrazolium klorida biru boleh bertindak balas dengan gula penurun untuk membentuk mendakan merah Trioctylphene Oxide yang tidak larut. Dengan memerhatikan perubahan warna, adalah mungkin untuk menentukan kehadiran gula penurun dalam larutan. Kaedah ini mempunyai nilai penting untuk analisis dan pengenalpastian sebatian karbohidrat di makmal.
(2) Penentuan aktiviti enzim
Tetrazolium chloride blue juga boleh digunakan untuk menentukan aktiviti enzim tertentu, seperti succinate dehydrogenase (SDH). Dengan mengikat dengan suksinat dehidrogenase, tetrazolium klorida biru boleh dikurangkan kepada tetrazolium format biru (BTF), dan aktiviti enzim boleh dinilai dengan menguji spektrum penyerapan BTF. Kaedah ini sangat penting dalam penyelidikan mikrobiologi dan biokimia, kerana ia membantu untuk mendapatkan pemahaman yang lebih mendalam tentang mekanisme tindakan dan perubahan aktiviti enzim.
(3) Pewarnaan sel
Tetrazolium chloride blue juga boleh digunakan untuk mengotorkan sel, bakteria dan bahagian tisu di makmal. Prestasi pewarnaannya yang unik menjadikan struktur sel dan tisu lebih jelas kelihatan, membantu memerhati dan menganalisis morfologi, struktur dan fungsi sel.
(1) Reagen sintesis biokimia
Tetrazolium chloride blue boleh digunakan sebagai reagen sintesis biokimia, seperti dalam penyediaan kompleks kationik DNA dan imunosorben untuk antibodi anti DNA. Aplikasi ini meluaskan lagi skop penyelidikan tetrazolium klorida dalam bidang biokimia.
(2) Menguji reagen
Selain mengurangkan pengesanan gula,tetrazolium biru kloridajuga boleh digunakan untuk penyediaan reagen pengesanan biokimia yang lain. Sifat kimianya yang unik menjadikannya salah satu bahan mentah yang penting untuk menyediakan pelbagai reagen pengesanan.
Dalam bidang pertanian, tetrazolium klorida boleh digunakan sebagai racun serangga bakteria. Bacillus subtilis penghasil kristal tertentu boleh menghasilkan endotoksin dan eksotoksin, yang boleh melumpuhkan usus serangga, merosakkan lapisan usus, dan menjadikan sel-sel nutrien bakteria lebih terdedah kepada pencerobohan dan menembusi membran bawah usus ke dalam hemolimfa. Tetrazolium klorida, sebagai salah satu komponen tambahan bagi jenis racun serangga bakteria ini, boleh digunakan untuk mengawal perosak pertanian seperti ulat pain, pengorek padi, pengorek padi, dan pengorek jagung.
Sebagai tambahan kepada aplikasi utama yang disebutkan di atas, tetrazolium chloride blue mungkin juga mempunyai nilai aplikasi tertentu dalam bidang lain. Contohnya, ia boleh digunakan sebagai pemangkin atau penunjuk untuk tindak balas kimia tertentu, atau mempamerkan sifat fizikal atau kimia unik lain di bawah keadaan tertentu tertentu.
Kaedah untuk menghasilkanTetrazolium biru kloridadi makmal terutamanya berdasarkan kaedah o-phenylenediamine, yang merupakan kaedah sintesis klasik dan telah mengalami pelbagai penambahbaikan untuk meningkatkan hasil dan ketulenan produk. Berikut adalah langkah pengeluaran terperinci dan persamaan kimianya yang sepadan:
1. Kaedah tekanan atmosfera Ortho phenylenediamine
(1) Penyediaan bahan mentah:
Larutkan o-phenylenediamine dalam larutan akueus asid asetik dan sediakan larutan akueus natrium nitrit. Kedua-dua penyelesaian perlu disejukkan terlebih dahulu kepada 0 darjah sebelum dicampur.
(2) Tindak balas pencampuran:
Dalam mandi ais, campurkan dengan cepat larutan o-phenylenediamine dan larutan natrium nitrit untuk memulakan tindak balas. Dalam langkah ini, o-phenylenediamine mengalami tindak balas diazotisasi dengan natrium nitrit untuk membentuk garam diazonium.
Persamaan kimia: C6H8N2+2NaNO2+2HCl → C6H4 (N2) 2Cl2+2NaCl+2H2O
(3) Tindak balas gelung tertutup:
Selepas itu, suhu dinaikkan dengan cepat kepada 80 darjah, menyebabkan garam diazonium mengalami tindak balas gelung tertutup dan menghasilkan nitrotetrazolium klorida.
Persamaan kimia: C6H4 (N2) 2Cl2 → C10H8N4O2Cl2 (nitrotetrazolium chloride)
(4) Rawatan selepas:
Selepas tindak balas gelung tertutup selesai, sejukkan dan tapis larutan tindak balas untuk mendapatkan produk mentah nitrotetrazolium klorida. Kemudian, pembersihan selanjutnya dilakukan melalui langkah-langkah seperti mencuci dan mengeringkan.
2. Kaedah tekanan tinggi yang lebih baik untuk o-phenylenediamine
Kaedah ini dicipta oleh Amerika Syarikat, dan berbanding dengan kaedah tekanan atmosfera, ia meningkatkan suhu dan tekanan tindak balas, dengan itu meningkatkan hasil dan ketulenan produk.
(1) Penyediaan bahan mentah:
Sama seperti kaedah tekanan atmosfera, larutkan o-phenylenediamine dan natrium nitrit dalam pelarut yang sesuai. Tetapi dalam kaedah ini, keadaan suhu dan tekanan yang lebih tinggi biasanya digunakan.
(3) Rawatan selepas:
Begitu juga, selepas tindak balas selesai, langkah-langkah seperti penyejukan, penapisan, pencucian dan pengeringan diperlukan untuk membersihkan produk.
(2) Proses tindak balas:
Di bawah suhu dan tekanan tinggi, o-phenylenediamine mengalami tindak balas diazotisasi dengan natrium nitrit, diikuti dengan tindak balas gelung tertutup. Disebabkan oleh perubahan dalam keadaan tindak balas, kaedah ini mempunyai kadar tindak balas yang lebih cepat dan hasil yang lebih tinggi.
Persamaan kimia adalah sama dengan kaedah tekanan atmosfera.
3. perkara yang memerlukan perhatian
Keselamatan: Oleh kerana sifat toksik kedua-dua o-phenylenediamine dan natrium nitrit, adalah perlu untuk mematuhi prosedur operasi keselamatan dengan ketat dan memakai peralatan perlindungan yang sesuai semasa eksperimen.
Keadaan tindak balas: Suhu dan tekanan tindak balas adalah faktor penting yang mempengaruhi hasil dan ketulenan produk. Oleh itu, dalam operasi praktikal, adalah perlu untuk menyesuaikan keadaan tindak balas mengikut situasi tertentu.
Langkah penulenan: Langkah penulenan nitrotetrazolium klorida adalah penting untuk mendapatkan produk ketulenan tinggi. Dalam operasi praktikal, pelbagai kaedah penulenan mungkin diperlukan, seperti penghabluran semula, kromatografi lajur, dsb.
Ringkasan: Pengeluaran tetrazolium klorida di makmal adalah berdasarkan kaedah o-phenylenediamine dan kaedahnya yang lebih baik. Dengan melaraskan keadaan tindak balas dan langkah penulenan, produk chloronitrotetrazolium klorida ketulenan tinggi boleh diperolehi. Dalam operasi praktikal, adalah perlu untuk mematuhi prosedur operasi keselamatan dengan ketat untuk memastikan keselamatan dan kemajuan lancar proses eksperimen.
Cool tags: tetrazolium blue chloride cas 1871-22-3, pembekal, pengilang, kilang, borong, beli, harga, pukal, untuk dijual