IPTG, CAS 367-93-1, struktur kimia terdiri daripada isopropil - Ia terdiri daripada kumpulan D-thiogalactoside dan fosfat. Antaranya, - D-thiogalactoside adalah analog galaktosa, di mana atom sulfur menggantikan atom oksigen. Struktur glikosida khas ini membolehkan IPTG mengikat DNA dan mendorong ekspresi gen. IPTG mempunyai keterlarutan yang rendah dalam air, tetapi boleh larut dengan baik dalam garam fisiologi dan penimbal fosfat. Ia berasid dengan nilai pKa 4.5, yang berkaitan dengan kumpulan fosfat dalam struktur molekulnya. Ia tidak mudah untuk mengkristal dalam air tulen, tetapi ia boleh membentuk kristal dalam larutan kepekatan tinggi atau apabila sebatian lain ditambah. Oleh kerana keupayaannya untuk mendorong ekspresi protein bakteria, IPTG sensitif kepada mikroorganisma tertentu. Sebagai contoh, sesetengah bakteria mungkin berhenti berkembang atau mati selepas terdedah kepada IPTG.
(Pautan Produk 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html ）
(Pautan Produk 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html ）
Sintesis enzimatik IPTG ialah kaedah yang menggunakan enzim untuk memangkinkan tindak balas galaktosa dan uridin trifosfat untuk menghasilkan kumpulan isopropil- - Kaedah untuk D-thiogalactoside. Berikut adalah langkah terperinci dan persamaan kimia kaedah ini:
1. Kerja penyediaan:
Sediakan reagen dan peralatan yang diperlukan, termasuk galaktosa, uridin trifosfat, enzim, penimbal, bekas tindak balas, pengawal suhu, dsb.
Tambah galaktosa dan uridin trifosfat dalam perkadaran tertentu kepada bekas tindak balas.
Tambah jumlah enzim dan penimbal yang sesuai untuk mengekalkan kestabilan pH sistem tindak balas.
Letakkan bekas tindak balas dalam pengawal suhu dan tetapkan suhu tindak balas yang sesuai.
2. Proses tindak balas
2.1 Campurkan sistem tindak balas secara sekata pada suhu yang sesuai.
2.2 Kekalkan suhu dan kestabilan pH sistem tindak balas dan teruskan mengacau.
2.3 Persampelan dan ujian isopropil pada selang masa yang tetap- - Penghasilan D-thiogalactoside.
2.4 Laraskan dos enzim dan masa tindak balas berdasarkan keputusan ujian untuk mendapatkan kumpulan isopropil- - D-thiogalactoside yang terbaik.
3. Persamaan kimia
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + UDP → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Antaranya, ATP mewakili adenosin trifosfat, UDP mewakili uridin difosfat, dan Pi mewakili fosforus bukan organik. Persamaan kimia ini mewakili pembentukan kumpulan isopropil daripada galaktosa dan uridin trifosfat di bawah tindakan enzim- - D-thiogalactoside dan ADP, serta Pi.
4. Pemisahan dan penyucian
Selepas tindak balas selesai, larutan tindak balas ditapis atau disentrifugasi untuk mengeluarkan galaktosa yang tidak bertindak balas, uridin trifosfat, dan kekotoran lain.
Menggunakan teknik pengasingan dan penulenan yang sesuai, seperti pertukaran ion, kromatografi, dsb., untuk menulenkan lagi isopropil- - D-thiogalactoside.
Menjalankan ujian kualiti, seperti kromatografi cecair berprestasi tinggi, spektrometri jisim, dsb., untuk memastikan kualiti produk memenuhi keperluan.
5. Rumusan
Kaedah sintesis enzimatik IPTG mempunyai selektiviti, hasil, dan ketulenan yang tinggi, serta keramahan alam sekitar dan keselamatan yang tinggi. Dalam kaedah ini, jenis, kepekatan, nilai pH, suhu dan keadaan lain enzim mempunyai kesan ketara ke atas keputusan tindak balas, dan kawalan dan pelarasan yang tepat diperlukan. Di samping itu, langkah pengasingan dan penulenan juga penting untuk memastikan kualiti dan ketulenan produk. Dalam operasi praktikal, pelarasan dan pengoptimuman hendaklah dibuat mengikut keadaan tertentu untuk mendapatkan kumpulan isopropil- - terbaik Pengeluaran dan kualiti D-thiogalactoside.
Kaedah tindak balas berbilang komponen IPTG ialah tindak balas yang menggunakan penyertaan berbilang komponen untuk mensintesis Kaedah isopropil- - untuk D-thiogalactoside. Berikut adalah langkah terperinci dan persamaan kimia kaedah ini:
1. Kerja penyediaan
Sediakan reagen dan peralatan yang diperlukan, termasuk galaktosa, uridin trifosfat, adenosin trifosfat, natrium tiosulfat, enzim, penimbal, bekas tindak balas, pengawal suhu, dsb.
Tambah galaktosa, uridin trifosfat, adenosin trifosfat, dan natrium tiosulfat dalam perkadaran tertentu kepada bekas tindak balas.
Tambah jumlah enzim dan penimbal yang sesuai untuk mengekalkan kestabilan pH sistem tindak balas.
Letakkan bekas tindak balas dalam pengawal suhu dan tetapkan suhu tindak balas yang sesuai.
2. Proses tindak balas
2.1 Campurkan sistem tindak balas secara sekata pada suhu yang sesuai.
2.2 Kekalkan suhu dan kestabilan pH sistem tindak balas dan teruskan mengacau.
Semasa proses tindak balas, perhatian harus diberikan untuk memerhati kemajuan tindak balas, melaraskan jumlah enzim dan masa tindak balas tepat pada masanya untuk mendapatkan kumpulan isopropil- - D-thiogalactoside yang terbaik.
3. Persamaan kimia
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Antaranya, ATP mewakili adenosin trifosfat, UDP mewakili uridin difosfat, ADP mewakili adenosin difosfat, dan Pi mewakili fosforus bukan organik. Persamaan kimia ini mewakili pembentukan kumpulan isopropil daripada galaktosa, uridin trifosfat dan adenosin trifosfat di bawah tindakan enzim- - D-thiogalactoside dan Pi.
4. Pemisahan dan penyucian
Selepas tindak balas selesai, larutan tindak balas ditapis atau disentrifugasi untuk mengeluarkan galaktosa yang tidak bertindak balas, uridin trifosfat, adenosin trifosfat, dan kekotoran lain.
Menggunakan teknik pengasingan dan penulenan yang sesuai, seperti pertukaran ion, kromatografi, dsb., untuk menulenkan lagi isopropil- - D-thiogalactoside.
Menjalankan ujian kualiti, seperti kromatografi cecair berprestasi tinggi, spektrometri jisim, dsb., untuk memastikan kualiti produk memenuhi keperluan.
5. Rumusan
Kaedah tindak balas berbilang komponen IPTG menggunakan kelebihan berbilang komponen yang mengambil bahagian dalam tindak balas bersama-sama, dengan selektiviti tinggi, hasil dan ketulenan. Dalam kaedah ini, sebagai tambahan kepada bahan mentah utama seperti galaktosa, uridin trifosfat, dan enzim, komponen tambahan seperti adenosin trifosfat dan natrium tiosulfat juga ditambah untuk menggalakkan tindak balas dan meningkatkan kualiti produk. Di samping itu, langkah pengasingan dan penulenan juga penting untuk memastikan kualiti dan ketulenan produk. Dalam operasi praktikal, pelarasan dan pengoptimuman hendaklah dibuat mengikut keadaan tertentu untuk mendapatkan kumpulan isopropil- - terbaik Pengeluaran dan kualiti D-thiogalactoside. Pada masa yang sama, perhatian harus diberikan kepada mengawal keadaan tindak balas seperti suhu, nilai pH, dan dos enzim untuk mencapai kesan tindak balas yang terbaik.