Penyelidikan antivirus telah dipercepatkan dalam beberapa tahun kebelakangan ini kerana saintis mencari cara yang berkesan untuk melawan virus baharu. Industri farmaseutikal dan bioteknologi sangat berminat Serbuk GS-441524, yang merupakan salah satu bahan kimia berpotensi yang sedang dikaji. Analog nukleosida ini sangat berkesan terhadap beberapa virus RNA, yang merupakan maklumat berguna untuk saintis dan jurutera yang bekerja pada ubat antivirus.
Kumpulan penyelidikan, syarikat ubat dan organisasi pembangunan dan pembuatan kontrak (CDMO) boleh membuat pilihan yang lebih baik tentang proses pembangunan mereka apabila mereka memahami cara sifat antivirus sebatian ini berfungsi. Komuniti saintifik masih mengkaji bagaimana molekul ini menghentikan proses replikasi virus, yang boleh membawa kepada penggunaan perubatan baharu.
Artikal ini melihat asas kimia keupayaan GS-441524 untuk melawan virus. Ia melihat cara ia berinteraksi dengan virus dan sejauh mana ia berfungsi terhadap pelbagai jenis coronavirus. Pandangan mendalam-ini akan membantu sesiapa sahaja-saintis penyelidikan, pekerja perolehan di syarikat ubat atau ketua teknikal di CDMO-memahami mengapa sebatian ini menjadi begitu penting dalam penyelidikan antivirus.
GS-441524 Fip
1. Spesifikasi Umum (dalam stok)
(1) Suntikan
20mg, 6ml; 30mg,8ml; 40mg,10ml
(2)Tablet
25/45/60/70mg
(3) API (serbuk tulen)
(4) Mesin penekan pil
https://www.achievechem.com/pill-tekan
2.Penyesuaian:
Kami akan berunding secara individu, OEM/ODM, Tiada jenama, untuk penyelidikan sains sahaja.
Kod Dalaman: BM-1-001
GS-441524 CAS 1191237-69-0
Analisis: HPLC, LC-MS, HNMR
Sokongan teknologi: Jabatan R&D-4
Kami sediakanSerbuk GS-441524, sila rujuk laman web berikut untuk spesifikasi terperinci dan maklumat produk.
produk:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/gs-441524-fip.html
Bagaimana Serbuk GS-441524 Bertindak sebagai Analog Nukleosida Terhadap Virus RNA
Peniruan nukleosida adalah salah satu strategi terpenting yang digunakan untuk membuat ubat antivirus. Molekul buatan manusia-ini kelihatan seperti nukleosida semula jadi, yang merupakan blok binaan DNA. Ini membolehkan mereka menghentikan virus daripada menyalin diri mereka sendiri. Serbuk GS-441524 berfungsi sebagai setara adenosin, yang bermaksud bahawa ia mempunyai struktur yang sama seperti adenosin, yang merupakan salah satu daripada empat nukleosida yang terdapat dalam RNA.
Strategi Mimikri Molekul
Fakta bahawa bahan kimia ini boleh menipu enzim virus menjadikannya sangat berguna. Apabila virus masuk ke dalam sel, mereka menggunakan jentera di dalam sel untuk membuat protein virus dan menyalin bahan genetiknya. RNA-polimerase RNA yang bergantung (RdRp) diperlukan untuk menyalin gen virus RNA seperti coronavirus dan penyakit utama yang lain. Semasa replikasi, enzim polimerase ini menambah nukleosida kepada rantai RNA yang semakin meningkat.
Pencerminan molekul ialah cara serbuk GS-441524 memanfaatkan proses ini. Oleh kerana strukturnya serupa dengan adenosin, polimerase virus boleh mengesannya dan memecahkannya. Molekul itu melalui fosforilasi sitoplasma, yang mengubahnya menjadi bentuk trifosfat aktifnya. Untuk bertindak melawan virus, aktiviti metabolik ini diperlukan kerana bentuk trifosfat boleh bergabung dengan rantai RNA virus oleh enzim RdRp.
Penyasaran Terpilih Jentera Viral
Peniruan nukleosida sangat berguna kerana ia adalah selektif. Bahan kimia ini berfungsi lebih baik terhadap polimerase virus berbanding polimerase selular manusia. Pemilihan ini mengurangkan risiko merosakkan sel perumah sambil mengekalkan kesan antivirus. Menurut penyelidikan, perubahan yang dibuat pada struktur serbuk GS-441524 FIP memudahkan virus RdRp mengenalinya sambil menyukarkan DNA manusia dan polimerase RNA untuk menggabungkannya.
Keunikan itu datang daripada perubahan kecil antara polimerase yang terdapat dalam virus dan sel. Lazimnya enzim virus mempunyai tapak aktif yang lebih terbuka yang boleh menerima nukleosida yang diubah, manakala polimerase manusia lebih selektif tentang substrat yang boleh diikat. Perbezaan biologi ini menjadikan tetingkap terapeutik, yang membolehkan penyelidik menghasilkan cara untuk melawan penyakit virus tanpa terlalu mencederakan sel.
Serbuk GS-441524 untuk Mengganggu Sintesis RNA Viral dalam Sel yang Dijangkiti
Salah satu cara utama varian nukleosida ini membunuh virus adalah dengan menghentikan pengeluaran RNA virus. Proses penamatan rantai bermula apabila polimerase virus menambah bentuk trifosfat aktif pada untaian RNA yang sedang berkembang. Ini menghentikan genom virus daripada menyalin dirinya lebih jauh.
Mekanisme Penamatan Rantaian
Nukleosida semulajadi mempunyai struktur kimia yang diperlukan untuk rantai terus menjadi lebih panjang, tetapiSerbuk GS-441524tidak. Apabila virus RdRp menambahkan nukleosida yang diubah ini kepada rantai RNA yang sedang berkembang, ia tidak dapat menyambungkan nukleosida seterusnya dalam barisan. Ini menjadikan halangan yang tidak dapat dilalui oleh polimerase, menghentikan pengeluaran genom virus. Kesan penamatan rantai adalah sangat kuat kerana ia berlaku apabila virus mereplikasi secara aktif. Setiap rantaian RNA yang berakhir ialah percubaan replikasi yang gagal yang mengurangkan jumlah virus dalam sel yang terjejas.
Penghentian berterusan sintesis RNA ini mengurangkan bilangan zarah virus berfungsi yang dibuat dari semasa ke semasa, yang menghalang jangkitan daripada merebak ke sel berdekatan.
Penyelidik telah mendapati bahawa bahan kimia itu boleh ditambah kepada urutan RNA virus di lebih daripada satu tempat. Corak penggabungan bukan{1}}khusus ini bermakna tindakan antivirus tidak bergantung pada pukulan pada satu titik. Ini mengurangkan kemungkinan toleransi akan berkembang melalui mutasi satu-titik dalam genom virus.
Dinamik Penamatan Rantaian Tertunda
Kajian menarik kerana mereka menunjukkan bahawa serbuk GS-441524 boleh berfungsi sebagai pemutus rantai yang tertunda. Polimerase boleh menambah lebih banyak nukleosida sebelum replikasi berhenti, jadi ia tidak menghentikan pengeluaran RNA serta-merta apabila ia ditambah. Kaedah penamat tertunda ini berbeza daripada penamat rantai segera, dan ia mungkin membantu kompaun berfungsi dengan lebih baik.
Keputusan yang tertangguh membolehkan nukleosida yang diubah masuk lebih dalam ke dalam helai RNA virus, yang menyukarkan sistem pertahanan virus untuk mencari dan menyingkirkannya. Sesetengah virus RNA mempunyai aktiviti exonuclease, yang boleh mengeluarkan nukleosida yang telah ditambah secara salah dari hujung rantai RNA. Pendekatan penamat yang tertunda membantu serbuk GS-441524 FIP mengatasi sistem pembacaan pruf virus ini, yang menjadikannya lebih berkesan terhadap virus lebih lama.
Bolehkah Serbuk GS-441524 Membantu Menekan Pelbagai Strain Coronavirus?
Keupayaan bahan kimia antiviral untuk bekerja pada pelbagai jenis virus adalah satu kelebihan yang besar dalam menangani ancaman virus baharu. Coronavirus telah menunjukkan ia boleh merebak dengan cepat dan mudah, jadi mencari bahan kimia yang boleh melawan lebih daripada satu jenis adalah sangat penting.
Pemuliharaan RdRp Viral Merentasi Strain Coronavirus
Coronavirus mempunyai banyak persamaan genetik, terutamanya dalam cara mereka menyalin diri mereka sendiri. Enzim RNA-bergantung kepada RNA polymerase (RdRp) sangat serupa dalam banyak spesies dan jenis coronavirus. Ini menunjukkan bahawa bahan kimia yang menyasarkan fungsi RdRp mungkin terus berfungsi terhadap pelbagai jenis coronavirus.
Dalam kajian penyelidikan yang melihat keberkesanan kompaun, ia telah diuji terhadap pelbagai jenis coronavirus, seperti FIPV dan virus lain yang serupa.
Hasilnya menunjukkan bahawa virus yang berbeza ini semuanya dinetralkan oleh ejen antivirus yang sama, yang menyokong idea bahawa RdRp-sasaran analog nukleosida seperti serbuk GS-441524 boleh melawan pelbagai jenis coronavirus dengan berkesan.
Kaedah berasaskan-mekanisme adalah lebih baik daripada rawatan yang menyasarkan protein permukaan virus, yang berubah dengan lebih cepat. Tapak aktif polimerase mengekalkan struktur yang sama merentas versi kerana perubahan dalam kawasan penting ini sering menyukarkan virus untuk mereplikasi. Kerana kekangan genetik ini, virus tidak boleh mengubah dirinya untuk mengatasi penindasan analog nukleosida.
Pertimbangan Rintangan Varian
Aktiviti spektrum luas-nampak bagus, tetapi pakar masih memerhatikan sebarang tanda tentangan. Virus RNA banyak berubah, yang memungkinkan toleransi berkembang. Walau bagaimanapun, tahap ketepatan yang tinggi yang diperlukan untuk RdRp berfungsi menyukarkan membina rintangan terhadap varian nukleosida.
Perubahan yang menjadikan sebatian kurang sensitif juga boleh menjadikan polimerase kurang berkesan, yang menyebabkan virus itu tidak sesuai. Perdagangan ini-membantu mengekalkan kegunaan sebatian yang tinggi walaupun populasi virus berubah. Teknik gabungan yang menggunakan lebih daripada satu mekanisme antivirus mengurangkan peluang rintangan lebih banyak lagi. Ini adalah kaedah popular yang digunakan dalam penyelidikan dadah.
Bagaimana Serbuk GS-441524 Mengganggu Fungsi Polimerase Viral
Memahami interaksi kimia yang kompleks antara analog nukleosida dan polimerase virus memberi penerangan tentang cara ubat antivirus berfungsi dan membantu membimbing percubaan untuk membuat ubat baharu lebih baik.
Interaksi Tapak Aktif Polimerase
Enzim RdRp mempunyai tapak aktif-yang sangat jelas di mana nukleosida trifosfat boleh mengikat dan bergabung dengan rantai RNA yang semakin meningkat. Tapak aktif ini boleh mengenali ciri-ciri kimia tertentu nukleosida semulajadi dan mempercepatkan pembentukan ikatan fosfodiester yang menjadikan untaian RNA lebih panjang.
Bentuk trifosfat daripadaSerbuk GS-441524mengikat kepada sisa pengecaman yang sama seperti adenosin trifosfat semula jadi apabila ia sampai ke tapak aktif ini.Kajian struktur telah menunjukkan bagaimana asid amino dalam polimerase disusun dalam ruang untuk mengatur penempatan nukleosida.
Struktur seperti adenosin-sebatian membolehkan ia memenuhi keperluan mengikat ini, yang menjamin tempatnya untuk pemangkinan.
Agar polimerase berfungsi, ion logam, biasanya ion magnesium, menyelaras dan memudahkan proses kimia yang menghubungkan nukleosida. Molekul berfungsi dengan kimia penyelarasan ini dengan cara yang sama seperti substrat semula jadi, yang membolehkan enzim menambahnya pada rantai RNA sebelum menyedari bahawa sambungan rantai biasa tidak boleh berlaku.
Perubahan Konformasi Selepas Diperbadankan
Protein yang dipanggil enzim polimerase berubah bentuk semasa kitaran pemangkin. Mereka bergerak di sepanjang templat RNA dan menambah nukleosida, berubah daripada keadaan terbuka kepada keadaan tertutup. Menambah nukleosida yang diubah boleh mengubah dinamik struktur ini, yang boleh menghalang enzim daripada terus membuat protein. Menurut penyelidikan, polimerase mungkin berubah menjadi bentuk-tidak produktif selepas menambah bahan kimia yang menghalangnya daripada terus menjadi pemangkin.
Perubahan pada struktur ini menambah kesan penamatan rantai, yang pada dasarnya mengunci enzim dalam keadaan di mana ia tidak dapat melepaskan produk RNA siap atau mula membuat helai baru.
Kesan pada konformasi melangkaui titik penyerapan segera. Struktur yang diubah boleh menyebabkan pusat pemeriksaan integriti polimerase yang biasanya menyemak pasangan nukleosida yang betul, yang boleh menghentikan replikasi. Banyak-kesan berlapis ini menjadikan sistem perencatan yang kuat dan tidak bergantung pada satu titik lemah.
Serbuk GS-441524 dan Asas Saintifik Prestasi Antiviral Luas
Keupayaan kompaun untuk melawan virus melangkaui coronavirus kerana cara ia berfungsi dan fakta bahawa ia berkesan terhadap semua keluarga virus RNA.
Pemuliharaan Polimerase Virus RNA
Banyak virus RNA menggunakan enzim RdRp yang mempunyai sifat molekul dan fungsi yang serupa untuk menyalin diri mereka sendiri. Pemuliharaan ini disebabkan oleh had semula jadi pada fungsi polimerase-enzim perlu mengekalkan kesetiaan tinggi sambil bekerja dengan cukup pantas untuk menyokong replikasi virus. Tempat pengikatan adenosin dalam RdRp adalah sangat stabil, yang masuk akal kerana adenosin ialah salah satu daripada empat blok binaan RNA.
Mana-mana virus yang menggunakan RNA sebagai bahan genetiknya perlu dapat menggunakan adenosin dengan baik apabila ia menyalin dirinya sendiri. Akibat daripada keadaan ini, analog adenosin seperti serbuk GS-441524 boleh menggunakan kelemahan bersama untuk menyerang pelbagai jenis virus.
Dalam tetapan kajian, bahan kimia itu telah terbukti berkesan terhadap virus RNA selain daripada coronavirus. Penemuan ini menyokong idea bahawa kaedah analog nukleosida boleh menjadi sangat berkesan terhadap pelbagai jenis virus,Serbuk GS-441524berkemungkinan dapat melawan lebih daripada satu virus dengan satu perancah rawatan.
Kestabilan Metabolik dan Taburan Selular
Aktiviti antiviral bahan itu dibantu oleh kualiti farmaseutikalnya. Berapa lama bentuk trifosfat aktif kekal dalam sel ditentukan oleh kestabilan metabolik. Ini mempengaruhi berapa lama kesan antivirus bertahan selepas ia diberikan. Sebatian dengan kualiti kestabilan yang baik boleh mengekalkan jumlah yang berkesan untuk jangka masa yang lama, yang bermaksud bahawa ia tidak perlu didos sekerap. Corak pengedaran selular menentukan jenis sel yang membina sebatian yang cukup untuk menghentikan pertumbuhan virus.
Susunan kimia molekul menentukan sejauh mana ia boleh melalui dinding sel dan sampai ke bahagian tisu yang betul. Penyebaran terbaik memastikan sel yang terjejas mendapat tindakan antivirus yang mencukupi.
Para saintis yang mengkaji kualiti farmakokinetik sebatian itu menemui perkara yang menyokong keupayaannya untuk melawan virus. Adalah mungkin untuk sel mengambil nukleosida induk, dan mudah untuk sel mengubahnya menjadi bentuk trifosfat menggunakan laluan kinase mereka sendiri. Apabila perkara ini disatukan, mereka membuat corak pendedahan yang berfungsi dengan baik dalam sistem ujian.
Penghalang Rintangan dan Kestabilan Genetik
Salah satu perkara terbaik tentang bahan antiviral ialah ia sukar untuk menjadi tahan. Seperti yang telah kami katakan, perubahan dalam RdRp yang menjadikan sebatian kurang sensitif sering datang dengan kos kecergasan yang menghalangnya daripada membentuk dan merebak. Kestabilan genetik ini membantu antivirus berfungsi lebih lama semasa pusingan rawatan.
Kaedah rawatan gabungan meningkatkan tahap rintangan lebih tinggi dengan memerlukan mutasi berlaku pada masa yang sama dalam berbilang sasaran virus. Syarikat farmaseutikal sering menyusun rancangan rawatan yang merangkumi ubat-ubatan yang berfungsi dengan cara yang menyokong satu sama lain. Ini mewujudkan kesan sinergistik sambil mengurangkan risiko rintangan. Cara kompaun berfungsi menjadikannya pilihan yang baik untuk digunakan dengan ubat antivirus lain yang menyasarkan aktiviti virus yang berbeza.
Kesimpulan
TheSerbuk GS-441524sangat baik untuk membunuh virus kerana ia berfungsi seperti adenosin dan menghentikan virus daripada membuat RNA. Ia berfungsi dengan mengaktifkan secara metabolik kepada bentuk trifosfat, ditambah kepada rantai RNA virus oleh RdRp, dan kemudian menamatkan rantai, yang menghentikan replikasi DNA virus. Oleh kerana struktur polimerase virus kekal sama merentas jenis, bahan kimia itu menunjukkan janji terhadap beberapa jenis coronavirus.
Aktiviti antivirusnya yang luas adalah berdasarkan ciri asas yang dikongsi oleh semua virus RNA, terutamanya fakta bahawa tapak aktif RdRp sentiasa sama. Lebih banyak penyelidikan sedang dilakukan untuk mengetahui lebih lanjut tentang halangan rintangan, kestabilan metabolik dan cara terbaik untuk menggunakan kelas sebatian ini.
Syarikat farmaseutikal, kumpulan kajian, organisasi pembangunan dan pembuatan kontrak (CDMO) dan lain-lain yang terlibat dalam pembangunan antivirus perlu dapat mengakses-bahan berkualiti tinggi yang disandarkan oleh dokumentasi saintifik terperinci. Bahagian kompaun dalam penyelidikan dan pembangunan menunjukkan betapa pentingnya untuk mempunyai rakan kongsi rantaian bekalan yang mengetahui tentang piawaian kualiti dan peraturan kerajaan.
Penyelidikan antiviral sedang bergerak ke hadapan, dan bahan seperti serbuk GS-441524 berguna untuk mempelajari cara virus mereplikasi dan membuat ubat baharu. Sambil kami terus mengkaji sebatian nukleosida, kami berharap dapat mempelajari perkara baharu yang akan membantu kami lebih bersedia menghadapi risiko virus baharu.
Soalan Lazim
1. Apakah yang menjadikan GS-441524 berkesan terhadap virus RNA?
+
-
Adenosin nukleosida analog GS-441524 difosforilasi dalam sel ke dalam bentuk trifosfat aktifnya. Molekul ini ditambah kepada genom oleh polimerase RNA yang bergantung kepada RNA virus semasa replikasi genom. Sebaik sahaja ia bergabung dengan rantaian RNA yang berkembang, ia berhenti menghasilkan, menghentikan replikasi virus. Bahan kimia berfungsi dengan polimerase virus kerana strukturnya menyerupai adenosin semula jadi. Perubahannya menghalang sambungan rantai, menjadikannya berkesan terhadap virus.
2. Mengapakah GS-441524 menunjukkan aktiviti menentang pelbagai jenis coronavirus?
+
-
Banyak spesies coronavirus berkongsi enzim RNA-bergantung kepada RNA polimerase, yang disasarkan oleh bahan kimia. Ciri struktur tapak aktif polimerase mesti dikekalkan untuk berfungsi dengan berkesan, mengehadkan perubahan genetik. Oleh kerana ia menyasarkan polimerase dan bukannya protein permukaan virus, tindakan sebatian adalah konsisten antara jenis coronavirus. Teknik berasaskan mekanisme-ini mewujudkan aktiviti antivirus terhadap beberapa virus.
3. Apakah spesifikasi kualiti yang perlu dicari oleh penyelidik semasa mendapatkan kompaun ini?
+
-
Bahan untuk kajian mesti dinilai dan disahkan tulen, selalunya Lebih besar daripada atau sama dengan 98%, seperti yang ditentukan oleh analisis HPLC. Spektrometri jisim harus mengesahkan sisa pelarut, kandungan lembapan dan kestabilan pada sijil analisis penuh. Pembekal harus membekalkan bekalan GMP dan dokumen permohonan kawal selia untuk pembangunan ubat. Ketekalan merentas kelompok, keadaan penyimpanan yang didokumenkan dan penjejakan rantaian bekalan ialah kriteria kualiti selanjutnya yang membantu penemuan percubaan menjadi penyelidikan yang boleh dipercayai dan memajukan.
Perlukan Pembekal Serbuk GS-441524 Boleh Dipercayai untuk Projek Penyelidikan atau Pembangunan Anda?
BLOOM TECH ialah pakar dalam menawarkan gred-penyelidikan dan{1}}farmaseutikalSerbuk GS-441524yang disertakan dengan kertas kerja analisis penuh dan memenuhi semua keperluan undang-undang. Tapak pengeluaran kami adalah GMP-diperakui dan memenuhi piawaian yang ditetapkan oleh AS-FDA, EU dan CFDA. Ini menjamin kualiti dan kestabilan yang diperlukan oleh projek anda.
Sebagai pembekal yang layak kepada perniagaan farmaseutikal, institusi penyelidikan dan CDMO di seluruh dunia, kami tahu betapa pentingnya untuk memenuhi piawaian ketulenan, memastikan kumpulan itu konsisten dan memastikan rantaian bekalan berfungsi. Untuk membantu anda dengan penyelidikan dan pembangunan anda, pasukan teknikal kami memberikan anda sijil analisis yang teliti, data kestabilan dan dokumen sokongan kawal selia.
BLOOM TECH memberi anda jaminan kualiti dan perkhidmatan profesional yang anda perlukan, sama ada anda sedang menyelidik antivirus, mencari ubat baharu atau membuat proses pengeluaran lebih besar. Platform-semua kami-memberi anda harga yang jelas, masa menunggu yang tepat dan bantuan pakar yang pantas pada semua peringkat projek anda.
Hubungi pasukan kami hari ini untuk bercakap tentang keperluan unik anda dan ketahui bagaimana pengetahuan kami tentang sintesis kimia dan perantaraan farmaseutikal boleh membantu anda mencapai matlamat penyelidikan antivirus anda. Anda boleh menghantar e-mel kepada kami diSales@bloomtechz.comuntuk mendapatkan sebut harga, butiran terperinci atau sampel bahan untuk diperiksa. Bekerjasama dengan pembekal serbuk GS-441524 yang berdedikasi untuk meningkatkan sains antivirus melalui kebolehpercayaan dan kualiti.
Rujukan
1. Warren TK, Jordan R, Lo MK, et al. Keberkesanan terapeutik molekul kecil GS-5734 terhadap virus Ebola dalam monyet rhesus. Alam Semulajadi. 2016;531(7594):381-385.
2. Pedersen NC, Perron M, Bannasch M, et al. Keberkesanan dan keselamatan analog nukleosida GS-441524 untuk rawatan kucing dengan peritonitis berjangkit kucing yang berlaku secara semula jadi. Jurnal Perubatan dan Pembedahan Kucing. 2019;21(4):271-281.
3. Murphy BG, Perron M, Murakami E, et al. Analog nukleosida GS-441524 sangat menghalang virus peritonitis berjangkit kucing (FIP) dalam kultur tisu dan kajian jangkitan kucing eksperimen. Mikrobiologi Veterinar. 2018;219:226-233.
4. Siegel D, Hui HC, Doerffler E, et al. Penemuan dan sintesis prodrug phosphoramidate dari pyrrolo[2,1-f][triazin-4-amino] adenine C-nucleoside (GS-5734) untuk rawatan Ebola dan virus yang baru muncul. Jurnal Kimia Perubatan. 2017;60(5):1648-1661.
5. Agostini ML, Andres EL, Sims AC, et al. Kerentanan koronavirus kepada remdesivir antivirus (GS-5734) dimediasi oleh polimerase virus dan exoribonuclease pembacaan pruf. mBio. 2018;9(2):e00221-18.
6. Gordon CJ, Tchesnokov EP, Woolner E, et al. Remdesivir ialah-antiviral bertindak langsung yang menghalang RNA-polimerase RNA yang bergantung kepada coronavirus 2 sindrom pernafasan akut teruk dengan potensi tinggi. Jurnal Kimia Biologi. 2020;295(20):6785-6797.