Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. ialah salah satu pengeluar dan pembekal 3xflag peptide cas 402750-12-3 yang paling berpengalaman di China. Selamat datang ke pukal borong berkualiti tinggi 3xflag peptide cas 402750-12-3 untuk dijual di sini dari kilang kami. Perkhidmatan yang baik dan harga yang berpatutan disediakan.
3XFLAG Peptidaialah jujukan penanda peptida penting yang digunakan secara meluas dalam ekspresi protein dan proses penulenan dalam penyelidikan bioperubatan. Formula molekul C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Terdiri daripada 23 asid amino, jujukannya mengandungi tiga motif Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp berulang, yang memberikan ciri struktur khusus.
Mempunyai keterlarutan yang baik dalam pelarut tertentu. Sebagai contoh, dalam DMSO, keterlarutannya adalah tinggi, menjadikannya mudah untuk operasi dan eksperimen dalam larutan. Di samping itu, ia juga boleh mencapai kesan pembubaran yang baik dalam air melalui pemanasan sederhana. Ia juga mempunyai beberapa ciri khas. Sebagai contoh, ia mempunyai antigenik dan kereaktifan yang baik, dan boleh mengikat antibodi anti BENDERA tertentu. Keupayaan mengikat ini menjadikannya boleh digunakan secara meluas dalam eksperimen seperti imunopresipitasi. Dengan mengikat secara kompetitif kepada antibodi Anti FLAG, gabungan FLAG menyatakan protein yang mengikat kepada antibodi Anti FLAG boleh dielusi semasa imunopresipitasi, dengan itu mencapai penyetempatan, pengesanan dan penulenan protein sasaran.
|
Penutup Botol Dan Gabus Tersuai:
|
|
|
Formula Kimia |
C120H169N31O49S |
|
Misa tepat |
2860 |
|
Berat Molekul |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Analisis Unsur |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
3XFLAG Peptidaialah tag yang digunakan dalam penyelidikan protein, yang terdiri daripada 8 asid amino dengan urutan DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Fungsi utamanya adalah untuk berfungsi sebagai penanda untuk ekspresi dan penulenan protein, menyediakan cara yang mudah dan cekap dalam penyelidikan.
1. Pembersihan pertalian:
Ia boleh digunakan sebagai label untuk penulenan protein, dan melalui pertalian tinggi dengan antibodi anti BENDERA, protein sasaran boleh dibersihkan dengan mudah. Biasanya, protein sasaran ditransfeksi bersama ke dalam sel dengan vektor ekspresi yang mengandungi 3X FLAG PEPTIDE, dan kemudian disucikan dengan pertalian menggunakan antibodi anti FLAG untuk mendapatkan protein sasaran ketulenan tinggi dengan cepat dan cekap.
2. Ujian imunologi:
Oleh kerana imunogenisitasnya yang tinggi, ia boleh digunakan untuk mengesan ekspresi protein dan penyetempatan. Dengan menggunakan antibodi anti FLAG tertentu, teknik eksperimen seperti immunoblotting dan pewarnaan imunofluoresensi boleh dilakukan untuk mengesan tahap ekspresi dan pengedaran protein sasaran dengan cepat dan tepat.
3. Penapisan klon:
Ia juga boleh digunakan untuk kemudahan pemeriksaan klon protein. Dalam proses pembinaan vektor ekspresi protein, menyambungkan jujukan gen protein sasaran dengan jujukan 3XFLAG boleh memudahkan pemeriksaan klon positif dengan protein sasaran melalui pengesanan imun dan kaedah lain, dengan itu mempercepatkan proses penyelidikan fungsi protein.
4. Imunopresipitasi:
Ia juga boleh digunakan untuk eksperimen imunopresipitasi protein. Dengan mengikat protein yang mengandungi tag 3X FLAG PEPTIDE kepada antibodi anti FLAG, dan kemudian menggunakan bahan penjerapan seperti protein A/G agarose atau manik magnet, protein sasaran dan rakan berinteraksinya boleh dicetuskan secara terpilih daripada ekstrak sel untuk mengkaji rangkaian interaksi protein.
5. Pemeriksaan dadah:
Ia juga boleh digunakan dalam penyelidikan saringan dadah. Dengan menggabungkan teg 3X FLAG PEPTIDE dengan protein yang diminati,-penyaringan pemprosesan tinggi protein boleh dicapai. Kaedah saringan ini boleh digunakan untuk menemui sasaran ubat baharu, menilai interaksi protein ubat dan sebagainya.
6. Penyelidikan fungsi protein:
Pengenalan label tidak menjejaskan struktur semula jadi dan fungsi protein dengan ketara, dan oleh itu boleh digunakan untuk mengkaji fungsi biologi, penyetempatan subselular, interaksi, dan transduksi isyarat protein. Dengan memperkenalkan teg 3X FLAG PEPTIDE,-penyelidikan mendalam boleh dijalankan ke atas ciri biologi protein, yang membantu mendedahkan mekanisme tindakannya dalam biologi dan fisiologi selular.
3XFLAG Peptidaialah peptida yang mengandungi 8 asid amino, dengan urutan DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Ia biasanya digunakan sebagai tag protein untuk memudahkan pembersihan, pengesanan dan penyelidikan protein sasaran. Dalam proses biosintesis, ia boleh disediakan melalui sintesis kimia atau kaedah kejuruteraan genetik. Berikut adalah langkah terperinci kaedah kejuruteraan genetik:
1. Mereka bentuk dan mensintesis gen:
Pertama sekali, adalah perlu untuk mereka bentuk gen buatan yang mengandungi jujukan 3X FLAG PEPTIDE. Gen ini harus mengandungi urutan 3X FLAG PEPTIDE, serta penganjur, penamat dan penanda pemilihan yang sesuai (seperti gen toleransi antibiotik). Reka bentuk gen harus mempertimbangkan ciri dan keperluan ekspresi hos sasaran.
2. Pengklonan gen:
Seterusnya, gen buatan yang direka bentuk akan diklonkan ke dalam vektor ekspresi yang sesuai. Vektor yang biasa digunakan termasuk plasmid, vektor virus, dll. Proses pengklonan biasanya termasuk langkah berikut:
-Penguatan PCR: Menggunakan tindak balas rantai polimerase (PCR) untuk menguatkan jujukan gen sasaran daripada DNA templat.
-Pencernaan dan sambungan: Produk PCR dicerna dengan vektor ekspresi menggunakan endonuklease sekatan, dan kemudian disambungkan bersama oleh ligase DNA.
-Transformasi: Mengubah vektor ungkapan yang disambungkan kepada perumah bakteria seperti Escherichia coli untuk membentuk plasmid rekombinan.
-Pengenalan: Plasmid rekombinan telah dikenal pasti melalui PCR, pencernaan enzim, penjujukan DNA dan kaedah lain untuk mengesahkan bahawa gen sasaran telah berjaya diklonkan ke dalam vektor.
3. Protein sasaran ekspresi:
Memindahkan vektor ekspresi yang dibina ke dalam sel hos sasaran, seperti sel mamalia, sel yis, sel serangga, dsb. Dalam sel, vektor ekspresi ditranskripsikan ke dalam mRNA dan kemudian diterjemahkan ke dalam protein. 3X FLAG PEPTIDE akan dinyatakan bersama-sama dengan protein sasaran sebagai teg protein.
4. Pengekstrakan protein:
Kumpulkan sel yang ditransfeksi dan lakukan pemecahan sel, sentrifugasi dan rawatan lain untuk mendapatkan jumlah ekstrak protein.
5. Protein yang disucikan:
Menggunakan teknik penulenan pertalian seperti imunopresipitasi dan kromatografi pertalian, protein sasaran yang mengandungi tag PEPTIDE BENDERA 3X telah disucikan daripada jumlah ekstrak. Ini biasanya melibatkan pengikatan antibodi anti BENDERA kepada protein yang mengandungi 3X PEPTIDA BENDERA, dan kemudian mengasingkannya menggunakan lajur kromatografi afiniti atau manik magnet.
6. Kenal pasti protein:
Protein yang telah disucikan telah dikenal pasti dan dikira oleh elektroforesis gel SDS-PAGE, immunoblotting, spektrometri jisim dan teknologi lain untuk memastikan ketulenan dan integritinya.
Reaksi buruk
Dalam penyelidikan bioperubatan dan eksperimen berkaitan protein, tag peptida memainkan peranan yang penting. Mereka boleh membantu penyelidik dalam menulenkan, mengesan dan mencari protein sasaran, dengan sangat menggalakkan pembangunan sains protein.3XFLAG Peptidaialah peptida tag yang biasa dan digunakan secara meluas yang terdiri daripada tiga jujukan tag FLAG berulang. Teg FLAG pada asalnya direka oleh Hopp et al. pada tahun 1988, dan kemudiannya berkembang menjadi varian seperti 3XFLAG, yang mempunyai pertalian dan kekhususan yang tinggi dan boleh mengikat antibodi tertentu, memudahkan pengasingan dan pengenalan seterusnya. Walaupun 3XFLAG telah membawa banyak kemudahan dalam eksperimen, seperti agen biologi yang lain, ia juga boleh menyebabkan beberapa reaksi buruk.
Reaksi buruk berkaitan imun
Imunogenisiti
Imunogenisiti merujuk kepada keupayaan bahan untuk merangsang sistem imun badan untuk menghasilkan tindak balas imun. 3XFLAG, sebagai segmen peptida eksogen, mungkin diiktiraf oleh sistem imun badan sebagai komponen "bukan diri", dengan itu mencetuskan tindak balas imun. Walaupun urutan 3XFLAG agak pendek, dalam beberapa kes ia mungkin masih mengaktifkan sel B dan sel T, yang membawa kepada penghasilan antibodi. Antibodi ini bukan sahaja mengikat 3XFLAG percuma, tetapi juga boleh mengenali dan mengikat protein gabungan yang menyatakan tag 3XFLAG, yang menjejaskan fungsi normal dan pengedaran protein gabungan.
Reaksi alahan
Reaksi alahan ialah tindak balas imun yang tidak normal yang disebabkan oleh sistem imun yang terlalu sensitif terhadap alergen tertentu. Individu individu mungkin mengalami reaksi alahan apabila menggunakan 3XFLAG untuk percubaan atau rawatan. Keterukan gejala tindak balas alahan berbeza-beza. Kes-kes ringan mungkin hadir dengan gejala tempatan seperti gatal-gatal, ruam, dan eritema, manakala kes-kes yang teruk boleh mencetuskan tindak balas alahan sistemik seperti kejutan anaphylactic, dicirikan oleh penurunan mendadak dalam tekanan darah, kesukaran bernafas dan kehilangan kesedaran, menimbulkan ancaman serius kepada keselamatan nyawa.
Reaksi alahan
Mekanisme tindak balas alahan terutamanya berkaitan dengan antibodi IgE dalam sistem imun. Apabila badan mula-mula bersentuhan dengan 3XFLAG, sistem imun mengenalinya sebagai alergen dan merangsang sel B untuk menghasilkan antibodi IgE tertentu. Antibodi IgE ini melekat pada permukaan sel mast dan eosinofil. Apabila badan bersentuhan dengan 3XFLAG sekali lagi, ia mengikat antibodi IgE pada permukaan sel, mencetuskan sel mast dan eosinofil untuk membebaskan mediator bioaktif seperti histamin dan leukotrien, yang membawa kepada berlakunya gejala alahan.
Risiko penyakit autoimun
Pendedahan jangka panjang atau berulang kepada 3XFLAG boleh meningkatkan risiko mendapat penyakit autoimun. Penyakit autoimun merujuk kepada sejenis penyakit di mana sistem imun badan tersilap menyerang tisu dan organnya sendiri, mengakibatkan kerosakan tisu dan kemerosotan fungsi. 3XFLAG mungkin mendorong sistem imun untuk menghasilkan antibodi reaktif silang dan sel T melalui mekanisme simulasi molekul, di mana urutan asid aminonya adalah serupa dengan jujukan protein tertentu dalam badan itu sendiri.
Sel-sel imun dan antibodi ini bukan sahaja menyerang 3XFLAG asing, tetapi juga secara tidak sengaja merosakkan tisu normal badan, yang membawa kepada penyakit autoimun. Contohnya, penyakit autoimun tertentu seperti systemic lupus erythematosus dan rheumatoid arthritis mungkin berkaitan dengan tindak balas autoimun yang disebabkan oleh bahan eksogen. Walaupun pada masa ini tiada bukti jelas yang menunjukkan bahawa 3XFLAG secara langsung menyebabkan penyakit autoimun, potensi risiko ini tidak boleh diabaikan.
Kesan ke atas fungsi selular
Dalam beberapa kajian eksperimen, didapati bahawa kepekatan tinggi 3XFLAG mungkin mempunyai kesan toksik pada sel. Manifestasi sitotoksisiti termasuk perubahan dalam morfologi sel, gangguan integriti membran sel, perubahan dalam aktiviti enzim intraselular, dan perencatan percambahan sel. Mekanisme tindakannya mungkin berkaitan dengan interaksi antara 3XFLAG dan membran sel. Oleh kerana cas negatif 3XFLAG yang kuat,
ia mungkin mengikat komponen bercas positif pada membran sel melalui interaksi elektrostatik, mengubah kebolehtelapan dan kecairan membran sel, membawa kepada kebocoran bahan intrasel atau kemasukan bahan berbahaya dari luar, dengan itu menjejaskan fungsi fisiologi normal sel. Selain itu, 3XFLAG juga boleh memasuki bahagian dalam sel, mengganggu laluan isyarat, sintesis protein dan proses lain, memburukkan lagi kerosakan sel.
Kesan pada laluan isyarat selular
3XFLAG mungkin mengganggu laluan isyarat intrasel dan menjejaskan aktiviti fisiologi normal sel. Laluan isyarat selular ialah istilah kolektif untuk siri peristiwa molekul di mana sel bertindak balas kepada rangsangan luar, mengawal proses penting seperti pertumbuhan sel, pembezaan dan apoptosis. 3XFLAG mungkin mengganggu penghantaran biasa laluan isyarat dengan berinteraksi dengan molekul utama dalam laluan isyarat, mengubah tahap aktiviti atau ekspresi molekul isyarat.
Sebagai contoh, ia mungkin mengikat kepada reseptor pada permukaan sel, secara kompetitif menghalang pengikatan ligan semula jadi kepada reseptor dan menyekat penghantaran isyarat; Sebagai alternatif, ia boleh memasuki sel dan mengikat kepada protein transduksi isyarat, menjejaskan fosforilasi protein, nyahfosforilasi dan proses pengubahsuaian lain, mengganggu penghantaran dan penguatan isyarat. Gangguan dengan laluan isyarat selular ini boleh menyebabkan disfungsi selular, menjejaskan proses seperti percambahan sel, pembezaan dan apoptosis, yang seterusnya boleh memberi kesan buruk terhadap perkembangan dan fungsi normal tisu dan organ.
Kesan pada metabolisme selular
Metabolisme selular ialah istilah umum untuk siri tindak balas kimia yang berlaku dalam sel, menyediakan tenaga dan asas bahan untuk aktiviti kehidupan selular. 3XFLAG boleh menjejaskan proses metabolik selular, mengganggu pengeluaran tenaga selular dan sintesis bahan. Contohnya, ia boleh menjejaskan fungsi mitokondria, yang merupakan tapak utama untuk respirasi aerobik dan penghasilan tenaga dalam sel. 3XFLAG boleh mengubah kebolehtelapan dan potensi membran mitokondria dengan berinteraksi dengan protein atau lipid pada membran, menjejaskan fungsi rantai pernafasan mitokondria dan sintesis ATP,
membawa kepada bekalan tenaga selular yang tidak mencukupi. Selain itu,3XFLAG Peptidamungkin juga mengganggu proses intrasel seperti metabolisme glukosa dan metabolisme lipid, menjejaskan keseimbangan sintesis bahan dan penguraian dalam sel, dan mempunyai kesan negatif ke atas fungsi fisiologi normal sel.
Soalan Lazim
Apakah itu BENDERA 3X?
+
-
3X FLAG Peptide ialah peptida sintetik daripada 23 sisa asid amino. Motif Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp diulang tiga kali dalam peptida. Lapan asid amino pada terminal-C membentuk jujukan FLAG klasik (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Apakah perbezaan antara teg-bendera dan 3xflag?
+
-
Tanda-tag ialah jujukan 8 asid amino tunggal yang biasa digunakan dalam aplikasi imunopresipitasi, western blot dan imunofluoresensi. Sebaliknya, teg 3x Flag-mengandungi 22 asid amino, memberikannya pertalian yang lebih besar untuk antibodi anti-Bendera dan menjadikannya sangat berfaedah untuk aliran kerja penulenan protein.
Bagaimana untuk membubarkan 3X BENDERA?
+
-
Untuk menyediakan larutan stok, larutkan dalam TBS (50 mM Tris-HCl, pH 7.4, dengan 150 mM NaCl) pada kepekatan 5 mg/mL. Aliquot dan simpan pada –20 darjah . Pembekuan dan pencairan berulang tidak disyorkan.
Cool tags: 3xflag peptide cas 402750-12-3, pembekal, pengilang, kilang, borong, beli, harga, pukal, untuk dijual