4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide CAS 6160-80-1

4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide(4-MUG) ialah sebatian organik dengan formula molekul C16H13NO7 dan jisim molar 333.27 g/mol untuk CAS 6160-80-1. Ia biasanya kelihatan sebagai serbuk atau kristal putih hingga kuning muda. Ia mempunyai keterlarutan air yang baik dan boleh larut dalam air. Struktur molekul sebatian ini mengandungi kumpulan asid glukuronik (GlcA) dan kumpulan 4-methylumbelliferone (4-MeUmb). Kumpulan asid glukuronik disambungkan kepada 4-kumpulan metilumbelliferone melalui ikatan glikosidik. Ciri spektrum ciri. Sebagai contoh, di bawah cahaya ultraungu, kompaun mempamerkan pendarfluor yang kuat dan boleh digunakan untuk analisis kuantitatifnya. Panjang gelombang pengujaan maksimum dan panjang gelombang pelepasan maksimum ialah 365nm dan 448nm, masing-masing. Ia adalah asid lemah dengan nilai pKa yang lebih rendah dalam air. Sebagai substrat dengan sifat pendarfluor, ia mempunyai nilai aplikasi yang luas dalam pengesanan dan penyaringan aktiviti enzim. Prinsipnya yang mudah, operasi yang mudah, kepekaan yang tinggi dan kebolehkuantitian menjadikannya alat penting dalam pelbagai bidang seperti sains bioperubatan, kimia dan biologi.

4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide(4-MUG) ialah substrat pendarfluor yang digunakan secara meluas untuk pengesanan dan penyaringan aktiviti enzim.

1. Pengesanan aktiviti enzim

Prinsip: Pengesanan aktiviti enzim 4-MUG adalah berdasarkan cirinya yang dihidrolisiskan oleh enzim tertentu sebagai substrat. Apabila enzim bertindak pada 4-MUG, ia memecahkan ikatan glikosidiknya, membebaskan 4-methylumbelliferone (4-MU) dengan sifat pendarfluor. Dengan mengesan keamatan dan perubahan isyarat pendarfluor, aktiviti enzim boleh dinilai.

Medan permohonan:

(1) Analisis sampel biologi: Menggunakan 4-MUG sebagai substrat, aktiviti enzim tertentu dalam sampel biologi (seperti darah, air kencing, homogenat tisu, dll.) boleh dikesan. Ini sangat penting untuk diagnosis penyakit, penyelidikan metabolisme dadah, dan penemuan biomarker.

(2) Pemeriksaan perencat enzim: Dengan mengeram bersama 4-MUG dengan perencat enzim, kesan perencat enzim ke atas aktiviti enzim boleh diperhatikan. Kaedah ini boleh digunakan untuk menyaring dan menilai keberkesanan perencat enzim, memberikan panduan untuk reka bentuk dan pembangunan ubat.

(3) Penyelidikan kinetik enzim: Dengan menggunakan kepekatan 4-MUG yang berbeza sebagai substrat, parameter kinetik enzim, seperti pemalar Michaelis (Km) dan kadar tindak balas maksimum (Vmaks), boleh dikaji. Data ini membantu memahami mekanisme dan kecekapan tindak balas pemangkin enzim.

2. Pemeriksaan aktiviti enzim

(1) Penyaringan throughput tinggi: 4-MUG sesuai untuk pemeriksaan aktiviti enzim throughput tinggi kerana ia mempunyai sifat pendarfluor dan boleh mencapai pengesanan pantas dan sensitif. Dengan mengeram bersama sejumlah besar sebatian calon dengan 4-MUG, sebatian dengan peraturan aktiviti enzim boleh disaring.

(2) Pemeriksaan perencat enzim: Menggunakan 4-MUG sebagai substrat, sebatian dengan kesan perencatan enzim boleh disaring. Kaedah ini boleh digunakan untuk menemui perencat enzim baharu dan menyediakan molekul calon untuk reka bentuk dan pembangunan ubat.

(3) Pemeriksaan pengaktif enzim: Selain perencat enzim, 4-MUG juga boleh digunakan untuk menapis sebatian dengan kesan pengaktifan enzim. Dengan mengesan peningkatan isyarat pendarfluor, sebatian yang boleh meningkatkan aktiviti enzim boleh dikenal pasti, menyediakan laluan baharu untuk pengawalan fungsi enzim.

3. Pelabelan biofluoresensi: 4-Methyllumbelliferol-beta-D-glucuronide mempunyai sifat pendarfluor dan sering digunakan sebagai penanda biofluoresensi. Ia boleh memancarkan pendarfluor biru terang di bawah pengujaan cahaya ultraviolet, dan spektrum pelepasan bertindih dengan ketara dengan spektrum pengujaan, yang bermanfaat untuk pengesanan dan analisis pendarfluor. Probe pendarfluor boleh dibuat dengan mengikat 4-Methyllumbelliferol-beta-D-glucuronide dengan antibodi, protein atau biomolekul lain, yang boleh digunakan untuk pengesanan sensitif dan penyetempatan molekul sasaran dalam sampel biologi.

4. Penyelidikan mengenai metabolisme dadah:4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronidesering digunakan sebagai sebatian model untuk penyelidikan metabolisme dadah. Dalam penyelidikan metabolisme dadah, sebatian ini boleh mensimulasikan struktur metabolit semula jadi dan berfungsi sebagai model untuk kemungkinan produk perantaraan atau akhir yang mungkin dihasilkan semasa metabolisme dadah. Dengan mengkaji dan mencirikan proses metabolik ubat dalam organisma, kita boleh memperoleh pemahaman yang lebih mendalam tentang laluan metabolik, kinetik dan bioavailabilitinya.

Kaedah sintesis makmal bagi4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronidetermasuk langkah-langkah berikut:

(1) Pengenalan kumpulan pelindung: Pilih kumpulan pelindung yang sesuai untuk melindungi asid glukuronik dan elakkan tindak balas sampingan yang tidak perlu dalam tindak balas seterusnya. Kumpulan pelindung biasa termasuk kumpulan ester, kumpulan eter, dsb. Pilih metil ester sebagai kumpulan pelindung untuk menukar asid glukuronik kepada asid glukuronik metil ester. Tindak balas ini menggunakan metanol dan anhidrida karboksilik sebagai bahan tindak balas, dengan asid sulfurik sebagai mangkin.

Persamaan tindak balas adalah seperti berikut:

(CH₃)₂C(OH)-CH₂-COOH + H₂JADI₄→ (CH₃)₂C(O)-CH₂-COOH + CH₃OH

(2) Tindak balas gandingan: Tindak balas gandingan antara 4-methylumbelliferone dan asid glukuronik dengan kumpulan pelindung. Langkah ini biasanya memerlukan penggunaan agen gandingan seperti DCC, EDC, dan lain-lain untuk memudahkan tindak balas. Keadaan tindak balas perlu dikawal dengan sewajarnya untuk memastikan ketulenan dan hasil produk. Tindak balas ini menggunakan DCC sebagai agen gandingan,

(3) Persamaan tindak balas adalah seperti berikut:

(CH₃)₂C(O)-CH₂-COOH + NH₂-CH=CH-COOH + DCC + C₆H₅N₃O → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-COOH + H₂O + NH₄OH

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-COOH + NH₂(CH₃) → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH₃) + H₂O

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH₃) + HBr → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH₃) + HBr

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH₃) → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO[C₁₆H₈-(NH^-)-6]-Br(CH₃) + NaCl + NaBr

(3) Penyingkiran kumpulan pelindung: Dengan menggunakan campuran natrium metanol dan natrium etanol sebagai pemangkin, metil ester asid metil glukuronik dialihkan daripada 4-Methyllumbelliferyl beta D-glucuronide. Persamaan tindak balas adalah seperti berikut:

(CH₃)₂C(O)-CH₂-CO[C₁₆H₈-(NH^-)-6]-Br(CH₃) + CH₃ONa + C₂H₅ONa → (CH₃)₂C(O)-CH₂-CO[C₁₆H₈-(NH^-)-6] + 2NaBr + 2CH₃OH + C₂H₅OH

(4) Penulenan: Produk mentah ditulenkan dengan kromatografi lajur dan penghabluran semula untuk mendapatkan 4-Methyllumbelliferol-beta-D-glucuronide ketulenan tinggi. Proses khusus adalah seperti berikut:

Larutkan produk mentah dalam jumlah pelarut yang sesuai dan asingkan dengan kromatografi lajur. Pilih penjerap dan eluen yang sesuai, basuh kekotoran dan bahan mentah yang tidak bertindak balas mengikut urutan untuk mendapatkan produk tulen. Penghabluran semula ialah proses melarutkan produk tulen dalam jumlah pelarut yang sesuai dan mendapatkan produk tulen melalui penyejukan dan penghabluran. Penghabluran semula boleh mengeluarkan sejumlah kecil bahan mentah dan produk sampingan yang tidak bertindak balas, seterusnya meningkatkan ketulenan produk.

Cool tags: 4-methylumbelliferyl-beta-d-glucuronide cas 6160-80-1, pembekal, pengilang, kilang, borong, beli, harga, pukal, untuk dijual