Epitalon(pautan:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-cas-307297-39-8.html) ialah molekul peptida, yang dianggap mempunyai aktiviti biologi yang baik dan potensi nilai perubatan. Pada masa ini, penyelidikan peptida epitalon tertumpu terutamanya pada aplikasinya sebagai agen anti-penuaan.
Epitalon boleh memanjangkan panjang telomer pada hujung kromosom dengan mengaktifkan telomerase, dengan itu memberi kesan positif kepada percambahan dan penjanaan semula sel stem. Kajian telah menunjukkan bahawa Epitalon boleh menghalang tekanan oksidatif berbahaya dengan ketara, mengurangkan kerosakan DNA dan mengawal selia ekspresi faktor pertumbuhan seperti insulin-1 (IGF-1), dan akhirnya mencapai kesan mengurangkan kelajuan penuaan dan memanjangkan jangka hayat.
Di samping itu, Epitalon juga mempunyai kesan imunomodulator dan neuroprotektif. Epitalon boleh meningkatkan imuniti manusia dan menggalakkan pengiktirafan dan pembersihan badan daripada heterogen dan antigen diri. Di samping itu, Epitalon juga boleh mengurangkan kematian sel neuron dan neurodegenerasi, dengan itu mencapai kesan neuroprotektif. Epitalon juga mempunyai kesan anti-kanser, dan memberikan kesannya dengan mengawal selia kitaran sel, menggalakkan apoptosis sel, dan menghalang percambahan sel tumor.
|
|
|
Epitalon ialah penambah badan, sebatian polipeptida yang terdiri daripada empat asid amino alanin (Ala), asid glutamik (Glu), asparagin (Asp) dan lisin (Lys). Kaedah sintesis Epitalon terutamanya dibahagikan kepada sintesis kimia dan biosintesis.
Kaedah sintesis kimia:
Epitalon ialah peptida yang terdiri daripada empat asid amino dengan formula molekul C14H22N4O9. Epitalon boleh menggalakkan pembebasan hormon pertumbuhan manusia, dengan itu membantu melambatkan penuaan, meningkatkan tidur, dan meningkatkan imuniti.
1. Penyediaan bahan tindak balas:
Bahan tindak balas untuk sintesis Epitalon termasuk empat asid amino, alanin (Ala), asid glutamat (Glu), asparagin (Asp) dan lisin (Lys), serta reagen pengasilat seperti Boc-Lys-OtBu dan Asp(OtBu) 2 dan seterusnya. Ketulenan asid amino dan reagen ini mestilah lebih tinggi daripada 99 peratus, jika tidak, kualiti produk akan terjejas.
2. Langkah-langkah Sintesis Kimia
2.1 Sintesis alanin-4-anhidrida hidroksibutirik (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 peratus kesucian.
2.2 Sintesis Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 peratus
2.3 Sintesis Epitalon:
Tambah Asp(OtBu)2 dan Boc-Lys-OtBu ke dalam sistem tindak balas pemeluwapan mengikut susunan yang direka bentuk terlebih dahulu, dan jalani tindak balas pemeluwapan berbilang untuk mendapatkan Epitalon. Prosesnya adalah seperti berikut:
a. Reaksi kumpulan deproteksi:
Pertama, Asp(OtBu)2 telah dinyahlindungi, dan kumpulan pelindung Asp(OtBu)2 telah dikeluarkan menggunakan natrium hidroksida (NaOH) dan asid trichloroacetic (TCA) untuk menjana unit struktur Asp dan membebaskan BuOt pada masa yang sama. Masa tindak balas adalah 1 jam, dan suhu adalah suhu bilik. Selepas tindak balas, lakukan peneutralan asid-bes, tambah sejumlah besar larutan natrium klorida tepu, kemudian mendakan dengan etanol dan keringkan dalam vakum untuk mendapatkan Asp sebagai pepejal putih.
b. Tindak balas pemeluwapan:
Tambah Asp dan Ala-Hyp-Glu-OtBu ke dalam sistem tindak balas pemeluwapan, dan kemudian lakukan tindak balas pemeluwapan berbilang untuk mendapatkan Epitalon. Proses ini perlu dilakukan melalui rawatan yang berbeza.
Langkah pertama: alih keluar kumpulan pelindung Ala-Hyp:
Mula-mula, Ala-Hyp-Glu-OtBu telah dilarutkan dalam metanol, asid trichloroacetic (TCA) dan air ditambah untuk mengeluarkan kumpulan pelindung Hyp-OtBu yang digunakan untuk melindungi kumpulan amino untuk menjana Ala-Hyp-Glu-OH. Tindak balas perlu dijalankan pada suhu bilik, dan larutan tindak balas dirawat dengan NaOH selepas tindak balas untuk meneutralkan keasidan.
Langkah kedua: keluarkan kumpulan pelindung Glu-OtBu:
Kemudian, selepas pengeringan menyeluruh, Ala-Hyp-Glu-OH dicampur dengan Boc-Lys-OtBu, asid trichloroacetic dan air ditambah lagi, dan tindak balas dilakukan pada suhu bilik. Tindak balas ini mengeluarkan kumpulan pelindung Glu-OtBu untuk menjana Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
Langkah ketiga: alih keluar kumpulan perlindungan Lys:
Akhir sekali, menambah asid trichloroacetic, air dan metanol menghilangkan kumpulan pelindung Boc-Lys-OtBu untuk menjana Epitalon. Tindak balas perlu dijalankan pada suhu bilik, dan larutan tindak balas dirawat dengan NaOH selepas tindak balas untuk meneutralkan keasidan.
3. Analisis keputusan:
Produk Epitalon akhirnya diperoleh, yang boleh dicirikan dan disucikan dengan kaedah analisis yang berbeza. Contohnya, parameter seperti ketulenan, kekotoran dan berat boleh ditentukan menggunakan kaedah penulenan seperti European Pharmacopoeia (EP) atau United States Pharmacopeia (USP).
4. Ringkasan:
Epitalon ialah penggalak badan yang terdiri daripada empat asid amino alanin, asid glutamat, asparagin dan lisin. Kaedah sintesis kimia Epitalon terutamanya termasuk kaedah sintesis fasa pepejal dan kaedah sintesis fasa cecair, yang perlu menghubungkan pelbagai asid amino bersama-sama melalui tindak balas pelbagai langkah. Proses ini memerlukan kawalan berhati-hati terhadap keadaan tindak balas dan teknik penulenan untuk memastikan produk ketulenan tinggi.
Kaedah biosintetik:
Kaedah biosintesis adalah menggunakan biopemangkinan mikroorganisma atau enzim sintetik untuk menyediakan Epitalon, termasuk penapaian dan pemangkinan enzim.
1. Kaedah penapaian: Kaedah penapaian ialah kaedah biosintetik menggunakan mikroorganisma transgenik Escherichia coli untuk mengekspresikan Epitalon. Pertama, letakkan jujukan gen Epitalon ke dalam Escherichia coli dan kultur secara besar-besaran untuk ekspresi. Kemudian, pelbagai teknik penulenan seperti kromatografi pertukaran ion dan kromatografi gel digunakan untuk akhirnya mendapatkan produk tulen. Langkah-langkah khusus adalah seperti berikut:
1.1 Pilih bakteria perumah yang sesuai:
Untuk mensintesis Epitalon, adalah perlu untuk memilih strain perumah yang sesuai untuk ekspresi. Bakteria perumah yang biasa digunakan termasuk Escherichia coli (Escherichia coli), yis (Saccharomyces cerevisiae) dan kulat (Aspergillus oryzae). Apabila memilih bakteria perumah, adalah perlu untuk mempertimbangkan sama ada bakteria perumah mempunyai keupayaan untuk mensintesis protein dengan cekap, sama ada ia boleh melipat dan mengubah suai protein dengan betul, dan sama ada ia boleh menghasilkan produk sasaran hasil tinggi.
1.2 Reka bentuk urutan gen dan klon:
Selepas bakteria perumah dipilih, jujukan gen Epitalon (termasuk alanine, asid glutamik, asparagin dan jujukan asas lisin) perlu dimasukkan ke dalam bakteria perumah melalui teknologi penggabungan semula DNA. Lazimnya, jujukan gen diklonkan ke dalam vektor ekspresi yang merangkumi unsur-unsur seperti jujukan promoter dan terminator serta penanda antibiotik yang boleh dipilih.
1.3 Ekspresi dan pemurnian:
Selepas pengklonan selesai, vektor ekspresi diubah menjadi bakteria perumah, dan kemudian dikultur. Semasa proses penanaman, bakteria perumah akan mensintesis Epitalon mengikut urutan gen dalam vektor ekspresi. Setelah produk dihasilkan dalam kuantiti yang mencukupi, ia boleh diasingkan daripada sel dengan kaedah penulenan yang berbeza dan Epitalon ketulenan tinggi diperolehi.
2. Kaedah bermangkin enzim: Kaedah bermangkin enzim adalah untuk mensintesis Epitalon dengan menghubungkan asid amino yang berbeza dengan pelbagai enzim. Contohnya, L-glutamat-5-aminase digunakan untuk memangkinkan tindak balas glutamat dan butirat untuk mensintesis Glu-OtBu. Kemudian, gunakan L-asparaginase untuk memangkinkan tindak balas pemeluwapan asparagin dan Ala-Hyp-Glu-OtBu untuk mendapatkan Epitalon.
Kaedah sintesis Epitalon terutamanya dibahagikan kepada sintesis kimia dan biosintesis. Sintesis kimia pada masa ini merupakan kaedah sintesis Epitalon yang paling biasa digunakan. Biosintesis adalah untuk menyediakan Epitalon melalui biocatalysis mikroorganisma atau enzim sintetik, termasuk penapaian dan pemangkinan enzim. Walaupun kaedah biosintetik mempunyai potensi yang besar, penyelidikan dan pengoptimuman lanjut masih diperlukan. Epitalon ialah ubat yang berpotensi dengan prospek aplikasi yang luas, yang boleh digunakan dalam bidang anti-penuaan, pengawalan imun, perlindungan saraf dan rawatan kanser. Pada masa yang sama, Epitalon juga boleh digunakan sebagai makanan kesihatan dan produk penjagaan kesihatan untuk membantu pengguna menentang penuaan, meningkatkan imuniti, dan mengurangkan risiko penyakit. Walaupun penyelidikan mengenai Epitalon masih di peringkat awal, adalah dipercayai bahawa dengan penyelidikan yang mendalam mengenai mekanisme dan fungsinya, Epitalon akan menjadi ubat penting dan produk penjagaan kesihatan.