Serbuk Proteinase K CAS 39450-01-6

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. ialah salah satu pengeluar dan pembekal serbuk proteinase k cas 39450-01-6 yang paling berpengalaman di China. Selamat datang ke serbuk borong proteinase k berkualiti tinggi pukal cas 39450-01-6 untuk dijual di sini dari kilang kami. Perkhidmatan yang baik dan harga yang berpatutan disediakan.

Serbuk Proteinase Kialah protease serin tidak-spesifik yang sangat cekap digunakan secara meluas dalam biologi molekul dan biokimia, terutamanya untuk merendahkan protein dan menyingkirkan protein yang mencemari daripada persediaan asid nukleik. Ia berasal daripada album Engyodontium kulat (sebelum ini album Tritirachium) dan mengekalkan aktivitinya dalam julat suhu yang luas (20-60 darjah ) dan pH (4-12), walaupun apabila diinkubasi dalam larutan yang mengandungi SDS (0.5-1%) atau urea (4M) dalam keadaan denaturasi.

Enzim ini secara cekap memecahkan pelbagai jenis protein, termasuk RNase dan DNase, dengan membelah ikatan peptida (lebih disukai menghidrolisis terminal karboksil asid amino alifatik/aromatik), dan oleh itu digunakan untuk penyingkiran nuklease dalam pengekstrakan DNA/RNA untuk memastikan integriti asid nukleik. Selain itu, ia biasanya digunakan dalam penghadaman tisu (cth, parafin-sampel terbenam), lisis sel dan kajian proteomik.

Serbuk Proteinase K biasanya dibekalkan dalam bentuk lyophilized, yang sangat stabil (-20 darjah untuk penyimpanan jangka panjang) dan perlu dilarutkan dalam penimbal (cth Tris-HCl, EDTA) sebelum digunakan. Aktivitinya bergantung kepada Ca²⁺, tetapi agen pengkelat seperti EDTA hanya menghalang sebahagian aktiviti enzim. Degradasi diri perlu dielakkan semasa pengendalian dan penyahaktifan haba pada 65 darjah disyorkan. Disebabkan keupayaan menghidrolisis protein yang kuat, perlindungan yang teliti diperlukan untuk mengelakkan sentuhan kulit atau membran mukus.

Proteinase k serbuk, juga dikenali sebagai Proteinase K atau EC 3.4.21.14, ialah protease serine yang diasingkan dan disucikan daripada album Tritirachium Limber. Sejak pengasingan pertama oleh Wolfgang Ebeling et al. pada tahun 1974, proteinase K telah digunakan secara meluas dalam biokimia, biologi molekul, perubatan, dan industri kerana aktivitinya yang tinggi dan kekhususan substrat yang luas.

Dalam proses pengekstrakan DNA dan RNA, fungsi utama proteinase K adalah untuk merendahkan protein yang terikat kepada asid nukleik, membolehkan DNA atau RNA bebas dalam larutan untuk pengekstrakan dan penulenan seterusnya. Oleh kerana kestabilan dan aktivitinya yang tinggi dalam agen pendenaturasi seperti urea dan SDS, proteinase K biasanya digunakan untuk pengasingan plasmid atau DNA genom dan RNA.

proteinase K boleh menghalang aktiviti RNAse dan melindungi RNA daripada degradasi.

1. Pengekstrakan DNA dan RNA

 

Pengekstrakan DNA: Protease K boleh menghidrolisiskan histon yang mengikat DNA, membolehkan DNA tercerai dalam larutan. Selepas itu, kekotoran telah dikeluarkan melalui pelbagai kaedah seperti pengekstrakan fenol kloroform, pemendakan etanol, dsb., dan DNA yang telah dimurnikan dikumpulkan.
Pengekstrakan RNA: Semasa proses pengekstrakan RNA, enzim RNA biasanya terdapat dalam persekitaran, dan sistem sampel itu sendiri juga mungkin mengandungi enzim RNA, menjadikan RNA sangat terdedah kepada degradasi. Menambah sejumlah kecil

2. Teknologi hibridisasi in situ

 

Teknologi hibridisasi in situ, proteinase K biasanya digunakan untuk pemprosesan pra hibridisasi untuk mencerna protein yang mengelilingi DNA sasaran, meningkatkan peluang probe mengikat kepada asid nukleik sasaran, dan meningkatkan isyarat hibridisasi. Walau bagaimanapun, perlu diingatkan bahawa apabila kepekatan proteinase K terlalu tinggi, masa penghadaman terlalu lama, atau suhu pengeraman terlalu tinggi, ia boleh menyebabkan kerosakan pada struktur sel, yang membawa kepada penumpahan bahagian tisu dan kehilangan nukleus sel, dengan itu menjejaskan keputusan hibridisasi. Oleh itu, dalam aplikasi praktikal, adalah perlu untuk mengawal kepekatan dan masa rawatan proteinase K dengan ketat.

3. Penyahaktifan dan pembasmian kuman virus

 

Protease K, kerana aktiviti proteolitiknya yang kuat, boleh digunakan untuk penyahaktifan dan pembasmian kuman virus. Penyelidikan telah menunjukkan bahawa merawat air tulen dan air sisa domestik dengan kepekatan proteinase K tertentu boleh menyahaktifkan virus dengan berkesan. Protease K, sebagai pembasmi kuman yang menyahaktifkan virus, boleh mengurangkan potensi bahaya yang disebabkan oleh disinfektan kimia oksidatif konvensional kepada tubuh manusia, dan pengeluaran serta pengangkutannya selamat tanpa pencemaran alam sekitar yang tidak dapat dipulihkan.

4. Western blotting dan elektroforesis nadi

 

Protease K juga telah digunakan secara meluas dalam penyediaan DNA kromosom untuk elektroforesis berdenyut, Western blotting, dan eksperimen lain. Dalam eksperimen Western blot, proteinase K boleh digunakan untuk mengalih keluar protein bukan{1}}spesifik daripada sampel, meningkatkan kekhususan dan kepekaan blot. Dalam eksperimen elektroforesis nadi, proteinase K boleh merendahkan kekotoran protein dalam sampel DNA dan meningkatkan kecekapan elektroforesis.

5. Pengesanan dan pengenalan protein

 

Proteinase k serbukjuga boleh digunakan untuk pengesanan dan pengenalpastian protein tertentu. Sebagai contoh, dalam kajian transmissible spongiform encephalopathy (TSE), proteinase K boleh digunakan untuk mencerna protein dalam sampel tisu otak, dan untuk mengenal pasti kehadiran protein prion dengan mengesan rintangan prion patogenik terhadap proteinase K. Selain itu, proteinase K juga boleh digunakan untuk eksperimen seperti menentukan penyetempatan enzim pada membran sel dan mengeluarkan kation. protein yang terikat kepada endotoksin (seperti lisozim dan ribonuklease A).

1. Bidang perubatan

 

Penggunaan klinikal: Protease K mempunyai nilai perubatan tertentu dalam perubatan. Contohnya, merawat senak dengan protease gastrik, merawat bronkitis dengan protease berasid, merawat vaskulitis dengan elastase, dsb. Selain itu, trypsin, chymotrypsin, dan lain-lain juga biasa digunakan untuk pembersihan luka bernanah pembedahan dan rawatan perekatan serosal pleura.
Pengesanan dan diagnosis virus: Protease K juga mempunyai potensi aplikasi dalam pengesanan dan diagnosis virus. Dengan mencerna protein dalam sampel virus dan mendedahkan asid nukleik virus, ia memberikan kemudahan untuk ujian asid nukleik seterusnya.

2. Sektor perindustrian

 

Industri kulit: Protease K digunakan dalam industri kulit untuk penyingkiran rambut dan rawatan melembutkan, yang boleh menjimatkan masa dan memperbaiki keadaan kebersihan buruh.
Industri tekstil: Protease K boleh digunakan dalam industri tekstil seperti degumming sutera.
Industri makanan: Protease K boleh digunakan dalam industri makanan untuk pelembutan daging, penjelasan alkohol, dsb.
Detergen: Detergen dobi tambahan enzim ialah produk baharu dalam detergen. Detergen dobi yang mengandungi protease alkali boleh menghilangkan kesan darah dan kotoran protein dari pakaian. Tetapi apabila menggunakannya, berhati-hati untuk tidak menyentuh kulit untuk mengelakkan kerosakan protein pada permukaan kulit dan menyebabkan reaksi alahan seperti ruam dan ekzema.

Ciri-ciri struktur

 

Berat molekul proteinase K adalah kira-kira 28900 dalton (28.9 kDa), dan terdapat juga laporan literatur 29.3 kDa. Jujukan asid amino dan struktur ruang tiga-spatial sangat serupa dengan subtilisin keluarga protease serin, tetapi terdapat juga beberapa ciri unik.

Struktur ikatan disulfida: Molekul Protease K mengandungi ikatan disulfida, yang meningkatkan kestabilannya dan membolehkannya mengekalkan aktiviti dalam julat pH yang luas dan keadaan suhu tinggi.
tapak pengikat Ca ² ⁺:Proteinase k serbukmengandungi dua tapak pengikat Ca ² ⁺, yang, walaupun jauh dari pusat aktif, adalah penting untuk mengekalkan aktiviti pemangkin enzim. Mengalih keluar Ca ² ⁺ akan menyebabkan protease K kehilangan kira-kira 80% daripada aktivitinya, dan memperkenalkan semula Ca ² ⁺ hanya boleh memulihkan sebahagian aktivitinya.
Triad pemangkin: Protease K mempunyai triad pemangkin Asp-His69-Ser224, yang merupakan struktur utama untuk aktiviti hidrolitiknya.

Mekanisme tindakan

 

Protease K boleh menghidrolisis ikatan ester dan peptida secara keutamaan bersebelahan dengan C-terminal asid amino hidrofobik, sulfur-yang mengandungi asid amino dan asid amino aromatik, menghidrolisis protein menjadi peptida pendek. Mekanisme tindakannya terutamanya termasuk langkah-langkah berikut:

Pengikatan substrat enzim: Selepas protease K dicampur dengan substrat, substrat mengikat tapak aktif enzim, membentuk kompleks substrat enzim.
Tindak balas pemangkin: Di bawah tindakan tapak aktif, ikatan peptida substrat dihidrolisiskan untuk membentuk produk yang dipisahkan daripada enzim.
Kesan degradasi kuat protease K menjadikannya reagen utama dalam pelbagai tindak balas biokimia, terutamanya dalam proses pengekstrakan DNA dan RNA. Protease K secara berkesan boleh merendahkan protein terikat kepada asid nukleik, membebaskan asid nukleik, dan menghalang aktiviti nuklease, mengurangkan degradasi asid nukleik semasa pengekstrakan.

Proteinase k serbuk, sebagai protease serin yang sangat aktif dan spesifik substrat, mempunyai pelbagai aplikasi dalam biokimia, biologi molekul, perubatan dan industri. Ia boleh merendahkan protein yang mengikat asid nukleik dan membebaskan asid nukleik; Meningkatkan peluang untuk probe untuk mengikat kepada menyasarkan asid nukleik dalam teknologi hibridisasi in situ; Digunakan untuk penyahaktifan virus dan pembasmian kuman; Keluarkan kekotoran protein dalam eksperimen elektroforesis Western blot dan nadi; Mempunyai nilai perubatan dalam bidang perubatan; Digunakan dalam bidang perindustrian seperti pemprosesan kulit, industri tekstil, industri makanan, dan pembuatan detergen. Walau bagaimanapun, apabila menggunakan proteinase K, perhatian harus diberikan kepada kaedah penyimpanan dan keadaan penggunaannya untuk memastikan kestabilan dan aktivitinya.

Proteinase K ialah protease serin -spektrum luas yang digunakan secara meluas dalam biologi molekul, biokimia dan bidang penyelidikan perubatan kerana sifat enzimatik dan kestabilannya yang unik. Sebagai bentuk serbuk kering-beku, Serbuk Proteinase K memainkan peranan penting dalam eksperimen seperti pengekstrakan asid nukleik, pencernaan protein dan penhomogenan tisu. Walau bagaimanapun, penggunaan mana-mana reagen biologi datang dengan potensi risiko, dan tindak balas buruknya mungkin melibatkan kesihatan pengendali dan keselamatan persekitaran eksperimen.

Cool tags: serbuk proteinase k cas 39450-01-6, pembekal, pengilang, kilang, borong, beli, harga, pukal, untuk dijual