Indolicidinialah peptida pendek dengan aktiviti antibakteria, kepunyaan sejenis peptida antimikrob semulajadi. Terdiri daripada 13 sisa asid amino, asid amino ini dihubungkan bersama melalui ikatan peptida untuk membentuk rantai peptida padat. Dalam larutan, ia membentangkan konformasi heliks yang memudahkan interaksinya dengan molekul lain atau struktur selular. Oleh kerana komposisi dan urutan asid aminonya yang khusus, ia boleh mengikat secara selektif kepada sasaran dalam organisma, dengan itu menggunakan aktiviti antibakterianya.
Di bawah keadaan yang sesuai, ia boleh mengekalkan kestabilan struktur dan aktivitinya. Walau bagaimanapun, pada suhu yang lebih tinggi, ikatan peptidanya mungkin terganggu, membawa kepada perubahan struktur dan kehilangan aktiviti. Oleh itu, dalam penyelidikan dan aplikasi, adalah perlu untuk mengawal suhu eksperimen untuk memastikan kestabilan dan aktivitinya. Sebagai peptida antimikrob semulajadi, ia mempunyai pelbagai fungsi seperti antibakteria, pengawalan imun, anti-tumor dan antivirus.
Penutup Botol & Gabus Tersuai
|
|
|
Indolicidin COA
|
Formula Kimia |
C100H132N26O13 |
|
Misa tepat |
1905 |
|
Berat Molekul |
1906 |
|
m/z |
1906 (100.0%), 1905 (92.5%), 1907 (39.5%), 1907 (14.0%), 1908 (10.8%), 1907 (9.6%), 1906 (8.9%), 1908 (7.2%), 1909 (4.3%), 1908 (3.8%), 1908 (2.7%), 1907 (2.5%), 1907 (1.5%), 1909 (1.4%), 1906 (1.4%), 1908 (1.3%), 1909 (1.0%) |
|
Analisis Unsur |
C, 63.01; H, 6.98; N, 19.10; O, 10.91 |
aktiviti antibakteria
Indolicidinmempamerkan-aktiviti antibakteria spektrum luas terhadap pelbagai jenis mikroorganisma, termasuk pelbagai bakteria Gram-aerobik, Gram-positif dan kulat. Spektrum aktiviti yang luas ini menjadikannya calon yang menjanjikan untuk terapi antimikrob.
Permeabilisasi Membran
Struktur kimia yang unik, kaya dengan sisa triptofan dan dengan terminal karboksil termidasi, membolehkannya menembusi membran sel bakteria dan mengganggu integritinya. Ini membawa kepada pengeluaran kandungan bakteria, akhirnya mengakibatkan kematian bakteria.
Pengikatan DNA dan Perencatan Replikasi
Kajian telah menunjukkan bahawa ia boleh mengikat kepada-DNA heliks berganda, mungkin menghalang sejumlah besar enzim yang berkaitan dengan pemprosesan DNA. Khususnya, motif struktur PW-WP di tengah-tengah tiga belas-peptida ialah elemen struktur khas yang boleh menyelubungi heliks berganda DNA bentuk B, meningkatkan kestabilannya dan menghalang replikasi dan transkripsi DNA.
Percubaan in vitro telah menunjukkan keupayaan bakteria yang tinggi, dengan hampir-membunuh sepenuhnya strain patogen biasa seperti Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Keberkesanan ini menonjolkan potensinya sebagai agen antimikrob.
Had & Pembangunan Derivatif
Walaupun aktiviti antibakterianya yang ketara, aplikasi klinikal adalah terhad kerana sitotoksisitinya terhadap sel darah merah, yang boleh menyebabkan hemolisis dengan mudah.
Selain itu, pertalian tingginya untuk mengikat lipopolisakarida permukaan, sambil menyumbang kepada kesan antibakterianya, juga boleh membawa kepada pembangunan rintangan dadah dalam patogen tertentu.
Untuk mengatasi batasan ini, penyelidik telah membangunkan pelbagai derivatif dan analog.
Sebagai contoh, Indolicidin acetate dan Indolicidin TFA ialah derivatif yang diperoleh melalui pengubahsuaian kimia yang mengekalkan aktiviti antibakteria sambil mengurangkan ketoksikan kepada sel darah merah. Tambahan pula, beberapa kajian telah cuba untuk meningkatkan spektrum antibakteria dan mengurangkan sitotoksisiti dengan mengubah urutan asid amino, seperti X-rantai cincin dua indolik dan indolicidin. mengekalkan urutan asid amino dan aktiviti antibakteria yang sama sambil tahan terhadap protease.
Kesan Antivirus
Indolicidinjuga menunjukkan sifat antivirus, terutamanya terhadap virus tertentu seperti HIV-1 dan virus herpes simplex. Mekanisme antivirusnya agak berbeza daripada tindakan antikulatnya. Kajian telah menunjukkan bahawa ia boleh mengikat secara langsung kepada DNA, mengganggu pembentukan kompleks integrase-DNA daripada mengikat kepada integrase itu sendiri. Pengikatan ini mungkin menghalang pelbagai enzim yang berkaitan dengan pemprosesan DNA, dengan itu menghalang replikasi virus.
Perencatan HIV-1
Ia telah didapati menghalang replikasi HIV-1 dengan berkesan. Kepekatan antivirus yang diperlukan adalah lebih tinggi daripada untuk aktiviti antibakteria dan antikulat.
Sebagai contoh, kepekatan 333 ug/ml boleh menghalang HIV-1, dengan nilai IC50 antara 67 hingga 100 ug/ml pada 37 darjah . Pendedahan kepadanya selama 5 minit pada 37 darjah boleh menghalang 50% replikasi virus HIV, manakala aktiviti antivirus yang lengkap memerlukan kira-kira 60 minit.
Mekanisme Tindakan
Penyelidikan mencadangkan bahawa ia mengikat DNA, khususnya domain struktur PW-WP dalam indolicidin tiga belas-peptida, yang boleh membaluti heliks berganda DNA-bentuk B, meningkatkan kestabilannya dan menghalang replikasi dan transkripsi DNA. Keupayaan mengikat ini penting untuk aktiviti antivirusnya.
Kesan Imunomodulator
Indolicidintelah ditunjukkan untuk meningkatkan tindak balas sistem imun, membantu badan menentang jangkitan dan penyakit dengan lebih baik. Ini disebabkan oleh keupayaannya untuk berinteraksi dengan sel imun dan merangsang mereka untuk melancarkan pertahanan yang lebih kuat.
Sitokin adalah molekul isyarat yang memainkan peranan penting dalam peraturan imun. Ia boleh mempengaruhi pengeluaran sitokin, seperti interleukin dan kemokin, yang terlibat dalam mengatur tindak balas imun.
Sel imun semula jadi, seperti neutrofil, makrofaj, dan sel pembunuh semulajadi (NK), adalah barisan pertahanan pertama terhadap jangkitan. Ia boleh meningkatkan aktiviti sel-sel ini, menjadikannya lebih berkesan untuk membunuh patogen atau menyasarkan sel-sel yang tidak normal.
Walaupun kesan langsung pada imuniti adaptif (tindak balas sel T dan B) belum dikaji secara meluas, keupayaannya untuk memodulasi tindak balas imun semula jadi secara tidak langsung boleh mempengaruhi tindak balas imun adaptif.
Selain aktiviti antimikrob langsungnya, ia juga mempamerkan sifat-antiradang. Ini penting dalam mencegah keradangan yang berlebihan, yang boleh merosakkan tisu dan organ. Dengan mengawal selia laluan keradangan, ia menyumbang kepada mengekalkan homeostasis imun.
Penyelesaian Akhir
Terapi dalam Penyakit Berjangkit
Dengan meningkatkan tindak balas imun, ia boleh digunakan sebagai terapi pembantu untuk meningkatkan keberkesanan antibiotik atau vaksin.
Rawatan Penyakit Autoimun
Dengan memodulasi tindak balas imun, ia mungkin berguna dalam rawatan penyakit autoimun.
Terapi Kanser
Walaupun kesan antitumor langsung tidak ditunjukkan secara konklusif, sifat imunomodulatornya boleh dimanfaatkan.
Indolicidinialah peptida antimikrob (AMP) semulajadi yang terdiri daripada 13 asid amino, yang asalnya diasingkan daripada neutrofil lembu. Struktur triptofan (Trp) dan proline (Pro) yang unik memberikannya -spektrum luas aktiviti antibakteria, antivirus dan antikulat, serta kesan perencatan pada beberapa sel kanser. Oleh kerana potensi nilai aplikasi klinikalnya, sintesis dan pengeluaran Indolicidin telah menjadi tempat tumpuan penyelidikan. Artikel ini akan menghuraikan maklumat pembuatan daripada empat aspek: sintesis kimia, ekspres rekombinan, pengoptimuman pengubahsuaian dan cabaran dalam-pengeluaran besar-besaran.
Kaedah Sintesis Kimia
Sintesis kimia ialah kaedah utama untuk-pengeluaran besar-besaran Indolicidin di makmal, dan ia amat sesuai untuk kajian pengubahsuaian struktur.
Sintesis Peptida Fasa Pepejal (SPPS)
Prinsip:Berdasarkan strategi perlindungan Fmoc (fluorena methoxycarbonyl) atau Boc (tert-butoxycarbonyl), rantai peptida secara beransur-ansur dipasang pada resin.
Langkah-langkah:
Pemilihan resin:Resin yang biasa digunakan ialah resin amida Rink atau resin Wang.
Gandingan asid amino:13 asid amino disambungkan dalam urutan (jujukan: ILPWKWPWWPWRR-NH₂), dan triptofan (W) memerlukan perlindungan khas (seperti Boc-Trp(Boc)-OH).
Pemotongan dan pembersihan:Rantaian peptida dipotong menggunakan asid trifluoroacetic (TFA), dan kemudian ditulenkan oleh-kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) (ketulenan biasanya > 95%).
Kelebihan:Fleksibiliti tinggi, membenarkan pengenalan asid amino bukan{0}}semulajadi atau kumpulan yang mengubah suai.
Kelemahan:Kos tinggi, tidak sesuai untuk pengeluaran berskala besar-.
Sintesis fasa{0}}cecair
Kaedah ini sesuai untuk penyambungan serpihan peptida pendek, tetapi ia kurang biasa digunakan untuk sintesis Indolicidin.
Kaedah Ekspres Rekombinan
Untuk mengurangkan kos dan mencapai pengeluaran berskala besar-, penyelidik telah mencuba untuk menyatakan Indolicidin melalui penggabungan semula sistem mikrob atau selular.
Sistem Ekspres Prokariotik
Bakteria perumah: Escherichia coli (E. coli) ialah perumah yang paling biasa digunakan, tetapi isu berikut perlu ditangani:
Ketoksikan: Indolicidin mempunyai kesan membunuh pada sel perumah. Pemasaan ekspres perlu dikawal dengan ketat menggunakan promoter yang boleh diinduksi (seperti T7 atau araBAD). Keterlarutan: Terdedah untuk membentuk badan rangkuman. Tag gabungan (seperti SUMO, Trx) diperlukan untuk meningkatkan keterlarutan. Peptida sasaran boleh dilepaskan melalui pembelahan enzim kemudiannya. Pengoptimuman Proses: Ekspresi pada suhu rendah (20-25 darjah ) membawa kepada pengurangan dalam pembentukan badan kemasukan. Peptida isyarat rembesan (seperti PelB) digunakan untuk merembeskan peptida ke dalam ruang periplasmik, dengan itu mengurangkan ketoksikan intrasel.
Sistem Ekspres Eukariotik
Sistem yis (seperti Pichia pastoris):
Kelebihan: Mampu melakukan-pengubahsuaian terjemahan, sesuai untuk peptida kompleks.
Cabaran: Indolicidin mungkin terdegradasi oleh yis protease, jadi strain kurang protease-perlu digunakan.
Sel mamalia: Kos yang terlalu tinggi, bertujuan semata-mata untuk tujuan penyelidikan.
Pemprosesan hiliran
Gangguan dan tangkapan sel: Sel terganggu menggunakan ultrabunyi atau penhomogenan-tekanan tinggi, dan protein pelakuran disucikan melalui kromatografi afiniti.
Pembelahan dan penulenan enzimatik: Gunakan enterokinase atau SUMO protease untuk mengalih keluar tag, dan kemudian lakukan-pemurnian HPLC fasa terbalik bagi peptida sasaran.
Pengubahsuaian dan pengoptimuman struktur
Indolicidin semulajadi mempamerkan ketoksikan hemolitik dan ketidakstabilan proteinase, dan dengan itu memerlukan pengubahsuaian untuk meningkatkan prestasinya.
Penggantian asid amino
Kurangkan ketoksikan: Gantikan Arg (R) dengan asid amino hidrofobik (seperti Ala), mengurangkan interaksi dengan membran sel mamalia.
Tingkatkan kestabilan: Perkenalkan asid amino jenis D-atau -protein rintangan asid amino untuk menentang degradasi protease.
Lipidasi/PEGilasi
N-asetilasi terminal atau lampiran polietilena glikol (PEG) memanjangkan separuh-hayat.
Reka bentuk Heterodipeptida
Gabungan dengan serpihan AMP lain (seperti LL-37) untuk meningkatkan aktiviti atau meluaskan spektrum antibakteria.
Cabaran Pengeluaran-Skala Besar
Kawalan Kos
Sintesis kimia: Kos setiap gram boleh mencecah beberapa ribu dolar, yang tidak sesuai untuk keperluan klinikal. Penyusunan semula ekspres: Proses penapaian perlu dioptimumkan (seperti melalui-penanaman berketumpatan tinggi) untuk meningkatkan pengeluaran.
Kawalan Kualiti
Keperluan ketulenan: Peptida ubat mesti mematuhi piawaian FDA/EMA (kekotoran < 0.1%). Ujian aktiviti: Kepekatan perencatan minimum (MIC) dan ujian hemolisis (HC₅₀) adalah penunjuk utama.
Peraturan dan Keselamatan
Adalah perlu untuk menjalankan penilaian toksikologi praklinikal, terutamanya untuk imunogenik dan ketoksikan-jangka panjang.
Tinjauan Masa Depan
Sintesis bebas sel-: Menghasilkan dengan pantas menggunakan sistem terjemahan in vitro, mengelakkan ketoksikan perumah. Penghantaran nanocarrier: Meningkatkan penyasaran dengan menggabungkan liposom atau polimer.
Reka bentuk bantuan-AI: Meramalkan varian toksik-yang cekap dan rendah melalui pembelajaran mesin.
Pengeluaran daripadaindolicidinmemerlukan keseimbangan antara ketepatan sintesis kimia dan skalabiliti ekspres rekombinan dan nanoteknologi), aplikasi klinikalnya dijangka akan dipromosikan.
Soalan Lazim
Indolcidin ialah sejenis peptida antimikrobial aktif semula jadi dengan -aktiviti antibakteria spektrum luas yang sangat baik. Ia boleh menghalang dan menghapuskan pelbagai bakteria gram-positif, gram-negatif dan kulat separa dengan berkesan, dan juga mempunyai kesan anti-keradangan tertentu. Ia boleh menyekat pembebasan faktor keradangan, melegakan lesi keradangan tempatan, dan mengekalkan keadaan fisiologi organisma yang stabil.
Ia mempunyai nilai aplikasi yang kaya dalam pelbagai industri. Ia boleh digunakan sebagai-bahan mentah antibakteria berkecekapan tinggi untuk bahan tambahan makanan haiwan untuk mengurangkan kadar jangkitan ternakan dan ayam. Selain itu, ia juga boleh digunakan dalam antisepsis kimia harian, penyelidikan bioperubatan dan produk penjagaan luaran kulit, memainkan peranan antibakteria dan perlindungan yang selamat dan stabil.
Berbeza daripada agen bakteriostatik kimia tradisional, Indolcidin mempunyai risiko rintangan dadah yang rendah dan biokompatibiliti yang baik. Ia bertindak pantas terhadap mikroorganisma patogen dengan keberkesanan sederhana, tidak akan merosakkan sel tisu normal dengan mudah, dan memiliki kestabilan terma yang baik dan toleransi asid-bes, yang mudah untuk pemprosesan formula dan penyimpanan jangka-panjang dalam pelbagai persediaan.
Cool tags: indolicidin cas 140896-21-5, pembekal, pengilang, kilang, borong, beli, harga, pukal, untuk dijual